| | C. Ciências Biológicas - 4. Botânica - 2. Botânica Aplicada | | | PROLIFERAÇÃO E REGENERAÇÃO DO AMENDOIM (Arachis hipogaea) in vitro UTILIZANDO A CITOCININA BENZILAMINOPURINA | | | Cristiane Miranda Furtado 3 (autor) crismfurtado@bol.com.br | | Humberto Silva 1 (orientador) humbertosilva@uol.com.br | | Julita Maria Frota Chagas Carvalho 2 (co-orientador) julita@cnpa.embrapa.br | | Juliana Pereira de Castro 3 (colaborador) julianadecastro@bol.com.br |
| | 1. Prof. Dr. do Depto. De Farmácia e Biologia, Universidade Estadual da Paraíba - UEPB | | 2. Pesquisadora Dra. Embrapa Algodão | | 3. Graduanda do Depto. De Farmácia e Biologia, Universidade Estadual da Paraíba - UEPB |
| | INTRODUÇÃO:
O amendoim (Arachis hipogaea), originário da América Central, é uma planta herbácea anual, cujas sementes contém ao redor de 25% de proteína e 45 a 50% de óleo comestível (GODOY et al., 1999). A utilização de hormônios vegetais no cultivo de tecido é de fundamental importância. Em particular, as citocininas são hormônios que se caracterizam por apresentar uma grande capacidade de multiplicidade de brotos, ou seja, induz a formação de grande número de brotos e alta taxa de multiplicação em muitos sistemas de micropropagação (MARTINELLI et al. 1985). Além de que, o desenvolvimento de protocolo para induzir eficiente proliferação em um genótipo independente, é um procedimento desejável para a transformação de genótipos do amendoim. O presente trabalho objetivou induzir o superbrotamento da cultivar de amendoim BR-1, conduzindo-se a regeneração de plântulas em dois tipos de explantes (hipocótilo e gema cotiledonar), determinando-se o melhor meio nutritivo suplementado com a citocininas BAP, em concentrações diferentes para o superbrotamento assim como protocolar um tratamento eficiente para o enraizamento in vitro. | | METODOLOGIA:
Sementes da cultivar Br-1 foram desinfestadas em solução de NaOCl à 1,8% por 20 min., logo enxaguadas em água bidestilada estéril, onde ficaram imersas por 4h; posteriormente, retirou-se o eixo embrionário e inoculou-se em meio MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) para obtenção da planta matriz. Após o desenvolvimento da planta matriz, foram separados os explantes hipocótilo e gema cotiledonar e inoculados em meio MS suplementado com a citocinina benzilaminopurina (BAP), nas concentrações 0; 0,5; 2,5; 5; 10; 20mg.L-1. Foram considerados superbrotamento os explantes com mais de 2 brotos, sendo estes transferidos para um meio sem hormônio para o alongamento. As avaliações foram realizadas considerando-se os parâmetros: número de gemas por explante e produção de calos por explante. Após o alongamento, foram selecionados os de 2 e 3cm, para indução do enraizamento in vitro. Estes foram cultivados em meio MS meia força, suplementado com ácido -naftalenoacético (ANA) (0 mg.L-1; 0,05mg.L-1; 0,1 mg.L-1) na presença ou não do ácido indol-3-butírico (AIB) (0,1mg.L-1). O parâmetro de avaliação foi: peso da matéria fresca da raíz. Todos os meios utilizados foram suplementados com 3% de sacarose e 0,55% de ágar e o pH foi ajustado para 5,8 antes da autoclavagem a 120oC. Os inóculos foram mantidos a 252oC com um fotoperíodo de 16h de luz/8h de escuro e intensidade luminosa de 30µmol m2 s-1. | | RESULTADOS:
De acordo com os tipos de explantes utilizados, quando cultivados em meio MS suplementado com diferentes concentrações da citocinina BAP, foram obtidas plantas sadias superbrotadas ou apenas formação de calos. Em relação ao explante gema cotiledonar, observou-se que o tratamento que produziu maior índice de brotos foi o meio MS suplementado com 20mg.L-1 BAP, apresentando uma média de 24,9 brotos por explante aos 60 dias de cultivo, sendo esta média superior a dos demais tratamentos, embora, com exceção do MS sem hormônio, também obtiveram-se brotações satisfatórias apresentando uma média entre 23 e 18 brotos por explante. O explante hipocótilo respondeu apenas em formação de calos (aglomerados de células), não induzindo qualquer formação de brotos, sendo o meio MS suplementado com 2,5mg.L-1 BAP, o melhor tratamento observado, resultando em um maior número de calos grandes (44,4%) e o menor índice de explantes necrosados (11,1%). Os demais tratamentos, incluindo o sem presença de hormônio, responderam a formação de calos, porém, apresentaram um maior índice de explantes necrosados e calos com tamanhos pequenos. Quanto a indução do enraizamento, o meio onde constatou-se uma maior quantidade de matéria fresca da raiz foi quando suplementado com a combinação de 0,05mg.L-1 ANA + 0,1 mg.L-1 AIB. | | CONCLUSÕES:
Contudo os tratamentos suplementados com o hormônio BAP induziram o superbrotamento apenas no explante gema cotiledonar, sendo os melhores resultados encontrados nos tratamento contendo a presença do BAP na concentração de 20mg.L-1. A formação de calos no explante hipocótilo foi melhor constatada no tratamento contendo 2,5mg.L-1 BAP, com um maior índice de calos grandes, e o enraizamento in vitro dos brotos foi melhor observado no meio contendo combinação dos hormônios ANA e AIB. | | | Instituição de fomento: CNPq/PIBIC/UEPB | | | Trabalho de Iniciação Científica | | | Palavras-chave: Micropropagação; Arachis hipogaea; cultivo in-vitro. |
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Anais da 56ª Reunião Anual da SBPC - Cuiabá, MT - Julho/2004 |