IMPRIMIR VOLTAR C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 6. Bioquímica Expressão e atividade do receptor purinérgico P2Y4 ao longo da diferenciação neuronal in vitrode células P19 Karla de Oliveira Pelegrino 1, Antônio Henrique B. Martins 2, Rodrigo Ribeiro Rezende 1, Paromita Majumder 1 e Henning Ulrich 1 1- Depto. de bioquímica- USP 2- Depto.de Fisiologia- Unifesp , UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - USP Os receptores purinérgicos P2Y atuam por meio de uma proteína Gq/11, a mobilizando os estoques intracelulares de cálcio, em resposta a nucleotídeos de pirina, pirimidina e seus derivados. Durante a diferenciação neuronal é de grande importância a sinalização específica mediada pelos receptores de superfície celular que induzem, por exemplo, o aumento da concentração intracelular de cálcio. O P2Y4 é um dos receptores P2Y mais distribuídos ao longo do Sistema Nervoso Central, o que nos despertou o interesse em estudá-lo a fim de verificar qual o papel que o mesmo desempenha quando da diferenciação neuronal. Para isso, utilizamos células P19 derivadas de um carcinoma embrionário murino, capazes de se diferenciar para neurônios mediante o acréscimo de Ácido Retinóico, como modelo de diferenciação neuronal in vitro. Verificamos a expressão do receptor P2Y4 em células P19 indiferenciadas, no estágio de corpos embriônicos do dia 2 e no dia 6 da diferenciação, por meio de RT-PCR. Experimentos de Western-blotting nos mostraram a presença da proteína de P2Y4 em células P19 indiferenciadas, no estágio de corpos embriônicos do dia 2, nos dias 4 e 6 da diferenciação e em células já diferenciadas para neurônios no dia 9 da diferenciação. Além disso, por Medidas de Cálcio Intracelular observamos que há atividade de receptores purinérgicos em células P19; e embora a inespecifidade dos ligantes não nos permita delimitar a contribuição de cada receptor para a variação de cálcio intracelular observada, acreditamos que com emprego de técnicas como a de SELEX poderemos desenvolver ligantes específicos e assim precisar a potência da resposta do receptor P2Y4 e também de outros receptores purinérgicos que nos interessarem. Instituição de fomento: FAPESP, CAPES, CNPQ,Pró Reitoria de Cultura e extensão Trabalho de Iniciação Científica Palavras-chave:  células P19; diferenciação neuronal in vitro; receptor P2Y 4 Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005