|
| C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 1. Biologia Molecular |
|
| EXPRESSÃO DIFERENCIAL DE GENES EM CEPAS DE Trypanosoma cruzi PELA TÉCNICA DE MICROARRANJOS DE DNA |
|
| Sarah Branco Abdala 1, Cassio da Silva Baptista 1, Ricardo Vêncio 1,2 e Bianca Zingales 1 |
|
| 1- Depto.Bioquímica, Instituto de Química, Universidade de São Paulo - USP
2- BIOINFO-USP – Núcleo de Pesquisa em Bioinformática, Universidade de São Paulo - USP
, UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - USP |
|
| Trypanosoma cruzi, o protozoário causador da doença de Chagas, apresenta alta diversidade genética. Apesar disso, isolados do parasita foram agrupados em 2 grandes linhagens filogenéticas, nomeadas T. cruzi I e II.
O objetivo deste estudo foi investigar a expressão diferencial de genes em 6 cepas Trypanosoma cruzi, três isoladas de pacientes com manifestações cardíacas e três de pacientes com a forma indeterminada da doença. Um microarranjo de DNA foi construído contendo 755 ESTs (etiquetas de seqüências transcritas) e 32 genes de Trypanosoma cruzi previamente caracterizados. Estas sondas representam 730 seqüencias únicas. As seqüencias foram amplificadas por PCR a partir de plasmídios e imobilizadas em triplicata nas lâminas com o Generation III Microarray System (Molecular Dynamics). As imagens obtidas após hibridização com cDNA das cepas foram analisadas com o programa Array Vision 6.0. Após análise estatística, verificamos que 10 genes (1,25%) têm expressão aumentada em todas as cepas de pacientes com manifestações cardíacas quando comparadas com as cepas isoladas de pacientes assintomáticos. Por outro lado, 4 genes (0,5%) mostram o resultado oposto. A expressão relativa de vários genes foi confirmada por experimentos de Northern blot. Esses marcadores genéticos podem ter aplicação potencial em testes de diagnóstico/prognóstico e podem auxiliar na compreensão da patogênese da doença de Chagas.
|
|
|
Instituição de fomento: CNPq, FAPESP
| |
|
Trabalho de Iniciação Científica
|
|
| Palavras-chave:
Microarranjo de DNA; expressão gênica; Trypanosoma cruzi |
|
Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005
|