IMPRIMIR VOLTAR C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 6. Bioquímica ANÁLISE PROTEÔMICA COMPARATIVA DA EMBRIOGÊNESE DE Ocotea catharinensis UTILIZANDO-SE ELETROFORESE BIDIMENSIONAL E IMUNODETECÇÃO DE PROTEÍNAS G. Luiz Felipe Pimenta de Moraes 1, Carlos André Ornelas Ricart 1, Flávia Melisa de Souza Moraes 1 e Claudete Santa Catarina 2 1- Departamento de Biologia Celular, Instituto de Ciências Biológicas – UnB 2- Instituto de Biologia – USP, UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA - UNB Ocotea catharinensis é uma espécie de mata atlântica, que possui importância econômica devido à sua madeira e aos seus óleos essenciais. Sua intensa exploração, aliada a baixa produção e viabilidade de suas sementes, fazem com que essa espécie esteja ameaçada de extinção. Assim, é justificável o desenvolvimento de uma metodologia não convencional para a propagação e conservação desta espécie. Este trabalho procura estudar a embriogênese somática e zigótica de Ocotea catharinensis pela análise comparativa do perfil proteômico ao longo dos diferentes estágios de maturação do embrião. Embriões somáticos em quatro estágios embrionários diferentes foram homogeinizados em nitrogênio líquido. A extração de proteínas solúveis foi feita a 4ºC por 30 min., em tampão fosfato de sódio 50mM a um pH 7,5, 0,08% de 2-mercaptoetanol e 100 mM de PMSF. As proteínas foram precipitadas em 10% TCA. As concentrações protéicas foram dosadas pelo método de Bradford. As análises foram feitas por eletroforese bidimensional (2D-PAGE). Os perfis eletroforéticos foram obtidos usando gradientes imobilizados de pH (IPG) variando de 3 a 10 (não linear), e géis da segunda dimensão com gradiente de 8 a 15%. A comparação dos mapas proteômicos foi feita utilizando o programa computacional Image Master 2D. Os mapas proteômicos revelaram 146 spots em E1, 101 em E2, 171 em E3 e 153 em E4, porém os spots da região ácida não foram contados por falta de resolução. Os perfis eletroforéticos apresentaram um padrão geral semelhante, porém com diferencial expressão de alguns spots, sendo outros estágio-específicos. Algumas proteínas apresentaram uma expressão diferencial nos diferentes estágios embrionários, mostrando-se como possíveis marcadores moleculares. Assim a identificação e o estudo aprofundado dessas proteínas por espectrometria de massa pode auxiliar na compreensão da embriogênese dessa espécie. Instituição de fomento:  CNPq Trabalho de Iniciação Científica Palavras-chave:  Ocotea; Eletroforese; Embrião Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005