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| C. Ciências Biológicas - 8. Genética - 2. Genética de Microorganismos |
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| ESTUDO DA PROTEÍNA NÃO-ESTRUTURAL 4 (NSP4) DE ROTAVÍRUS EM ESPÉCIMES FECAIS DE CRIANÇAS EM BELÉM-PA |
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| Jackson Cordeiro Lima 1 e Joana D'Arc Pereira Mascarenhas 1 |
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| 1-Seção de Virologia - Instituto Evandro Chagas, INSTITUTO EVANDRO CHAGAS - IEC |
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| O rotavírus (RV) é responsável por 111 milhões de casos de diarréia ao ano e 440 mil mortes anuais, sendo 82% desses óbitos ocorrendo em países em desenvolvimento. Pertence a família Reoviridae, é um vírus não-envelopado, com simetria icosaédrica, genoma de fita dupla de RNA (dsRNA), com 11 segmentos, cada um codificando uma proteína, sendo 6 proteínas estruturais e 5 não estruturais. A proteína não estrutural 4 (NSP4) é uma glicoproteína transmembrana retículo endoplasmática específica, codificada pelo segmento 10 e está sendo denominada como a primeira enterotoxina viral, causando diarréia de natureza secretória. Objetivo foi realizar a caracterização molecular do gene da NSP4 em amostras de RV em crianças em Belém, Pará. O dsRNA foi extraído das suspensões fecais preparadas em Tris-Ca++, segundo o método descrito por Boom et al (1990), após foi realizada a RT-PCR com iniciadores JRG30/JRG31, obtendo-se um amplicon de 738 pb. O produto foi purificado com o kit QIAquick PCR Purification (Quiagen) e quantificado usando-se o peso molecular Mass Ladder (Invitrogen). O seqüenciamento foi realizado com o kit Big Dye Terminator (Applied Biosystems Inc, API) tendo o produto purificado com precipitação em etanol/isopropanol e posteriormente submetida à eletroforese em seqüenciador automático ABI Prism 3100 (Applied Biosystems Inc, API). A análise das seqüências foi realizada no programa BIOEDIT (v. 6.0.5), e a construção da árvore filogenética foi feita com o programa MEGA 3 (v. 3.0.0.41). De um total de 67 amostras analisadas pela RT-PCR, em 91 % (61/67) foi obtido o amplicon. Das 61 amostras seqüenciadas foi realizada a análise em 22 amostras. Não foi encontrada diferença significativa entre as amostras com diarréia e sem diarréia. Resultado semelhante foi achado por Chen et al (1997), entre neonatos em enfermaria de Taiwan. A amostra RN-150 mostrou diversidade de 20% em relação às demais. A seqüência da NSP4 revelou-se bastante conservada entre os rotavírus de Belém. |
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Instituição de fomento: IEC;PIBIC/CNPQ
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Trabalho de Iniciação Científica
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| Palavras-chave:
ROTAVÍRUS; NSP4; CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR |
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Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005
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