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| C. Ciências Biológicas - 10. Microbiologia - 3. Microbiologia |
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| AVALIAÇAO DA ATIVIDADE DE PROTEASE EM Proteus |
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| Melissa Cristina Pola 1, Sergio Olavo Pinto da Costa 1, Ana Paula Longaray Delamare 1 e Sergio Echeverrigaray 1 |
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| 1- Instituto de Biotecnologia, Universidade de Caxias do Sul - UCS, UNIVERSIDADE DE CAXIAS DO SUL - UCS |
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| A ocorrência de infecções hospitalares tem sido reconhecidas como importante problema de saúde pública no Brasil. Entre os microorganismos responsáveis pelas infecções do trato urinário destacam-se aqueles pertencentes ao gênero Proteus, particularmente P. mirabilis. Essas infecções são causadas devido à fatores de patogenecidade como toxinas e adesinas (proteases, lipases). As proteases estão envolvidas no dano aos tecidos e na resposta inflamatória do hospedeiro. Objetivou-se avaliar qualitativamente a atividade proteolítica de 15 isolados clínicos destes, 2 linhagens foram avaliadas quantitativamente e em diferentes pH e temperaturas. A atividade proteolítica qualitativa foi avaliada utilizando-se meio TSA contendo 0,7% de gelatina, TSA - 0,6% soro albumina bovina (BSA), TSA - 5% de ovo albumina mantido a 37°C por 20 horas e reveladas com uma solução saturada de sulfato de amônio e TSA com 0,6% de caseína e incubadas durante 20 horas a 37°C. As colônias que apresentaram um halo transparente foram consideradas protease positivas, aquelas que não apresentaram halo foram consideradas protease negativa. Para determinar a atividade proteolítica quantitativa utilizou-se o método proposto por Bonato et al (1982). Curvas de crescimento e atividade proteolítica extracelular (0-24h) foram determinadas. Experimento de inativação térmica das proteases extracelulares (25°C e 60°C – 30 min) mostrou que estas enzimas são termolábeis, perdendo a sua atividade quando tratadas com temperaturas acima de 40ºC. Determinação do efeito de pH sobre a atividade enzimática mostrou que as exoproteases confirmou a sua atividade em pH elevados. Na análise qualitativa 60% das amostras apresentaram atividade proteolítica em placas contendo gelatina e caseína, não houve atividade nas placas contendo BSA e albumina, indicando especificidade enzima-substrato. |
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Trabalho de Iniciação Científica
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| Palavras-chave:
Proteus; patogenicidade; protease |
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Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005
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