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C. Ciências Biológicas - 10. Microbiologia - 3. Microbiologia
ATIVIDADE PROTEOLÍTICA DE LINHAGENS DE Metarhizium spp
Juliana Nascimento Martins 1, Ana Rita Fonseca Nunes 1, Lúcia Rosane Bertholdo Vargas 1 e Neiva Monteiro de Barros 1,2
1- Instituto de Biotecnologia, Universidade de Caxias do Sul - UCS 2- Departamento de Ciências Biológicas, Universidade de Caxias do Sul - UCS, UNIVERSIDADE DE CAXIAS DO SUL - UCS
O carrapato Boophilus microplus causa grandes perdas econômicas na pecuária nacional, pois desvaloriza o couro, o leite e a carne, além de transmitir doenças para o gado. Para evitar o uso de acaricidas, surge como alternativa o controle com o fungo Metarhizium spp. Os fungos entomopatogênicos colonizam seus hospedeiros utilizando pressão mecânica e liberação de um complexo de enzimas. Essas enzimas degradam a cutícula, facilitando a penetração pelo fungo. As enzimas mais conhecidas são as lipases, proteases e quitinases. Visando entender os mecanismos envolvidos durante a infecção do hospedeiro, o objetivo deste trabalho foi analisar a produção de proteases de linhagens de Metarhizium spp. Foram utilizadas as linhagens M5, E9, E6 e CG-46 e a linhagem recombinante MFrp-gre. Para avaliar a atividade enzimática inoculou-se 1 ml de uma concentração de 2 x 108 con.ml-1 em frascos com 100 ml de meio Mandels & Reese (1960). Após 5 dias de crescimento em agitador orbital a 150 rpm a 28ºC, o micélio foi filtrado em papel Whatman n°1 e pesado. Inoculou-se 1 g de micélio seco em 100 ml de meio sem glicose e com 1 g de quitina. Depois de 6 dias em agitação, filtrou-se novamente, reservando o caldo enzimático. Em outra análise proteolítica inoculou-se todo o micélio produzido pelas linhagens (entre 1,3 g e 7,5 g). A análise da atividade proteolítica foi realizada conforme metodologia descrita por Sarath et al (1989). A leitura das absorbâncias foram realizadas em 440nm. Não houve diferenças significativas na produção de proteases em 440nm pelas linhagens quando inoculou-se 1g ou todo micélio produzido. A linhagem que apresentou maior atividade proteolítica foi a E6 (0,500) e a menor foi a CG-46 (0,299) em comparação à 1g de micélio. A produção de micélio pelas linhagens diferiu, entretanto a atividade proteolítica não foi relacionada com a quantidade de micélio utilizado.
Instituição de fomento: CNPq
Trabalho de Iniciação Científica
Palavras-chave:  Boophilus microplus; Metarhizium spp.; atividade proteolítica

Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005