IMPRIMIR VOLTAR C. Ciências Biológicas - 9. Imunologia - 4. Imunoquímica UTILIZAÇÃO DE MIOBLASTOS C2C12 NO DESENVOLVIMENTO DE MODELO in vitro PARA O ESTUDO DE FOSFOLIPASES A2 DE VENENOS ANIMAIS. MARCELA SANTANA BASTOS BOECHAT 1, RITA DE CÁSSIA MOTHÉ ESCOCARD 1, THEREZA LIBERMAN KIPNIS 1, JORGE HUDSON PETRETSKI 1 e MILTON MASAHIKO KANASHIRO 1 1-Laboratório de Biologia do Reconhecer, Centro de Biociências e Biotecnologia, Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro., UNIVERSIDADE ESTADUAL DO NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO - UENF Envenenamentos causados por serpentes do gênero Bothrops são caracterizados por uma reação inflamatória sistêmica aguda e danos teciduais locais que podem progredir para uma destruição tecidual generalizada. Fosfolipases A2 (PLA2) são importantes componentes miotóxicos destes venenos, que induzem um padrão similar de eventos degenerativos em células musculares. A necrose do músculo esquelético causada por esta enzima pode ser seguida de danos permanentes ao tecido, podendo resultar na perda da habilidade ou amputação do membro atingido. Este trabalho tem como objetivo estabelecer um modelo in vitro para estudo do mecanismo de ação de PLA2 dos venenos animais. Para este fim foi utilizada uma linhagem de mioblastos murinos C2C12 que podem fundir-se e diferenciar-se em miotubos longos e multinucleados, quando cultivados em meio DMEM High Glucose suplementado com 1% de soro equino. Células C2C12 diferenciadas foram tratadas com veneno bruto de B. atrox e em diferentes intervalos de tempo a integridade da membrana plasmática foi avaliada pelo uso do corante brometo de etídeo. A liberação de Creatine-Kinase (CK) foi quantificada 3 horas após o tratamento dos miotubos com PLA2 do veneno, indicando lesão celular. A possível participação dos miotubos na produção de mediadores inflamatórios foi também avaliada por ELISA e RT-PCR. Doses crescentes de PLA2 não induziram a produção de níveis detectáveis de IL-1beta, MIP-1beta e MIP-2 pelos miotubos, porém, observou-se à produção de IL-6 de uma maneira dose-dependente. Em miotubos estimulados com veneno bruto de também pôde se observar mensagens gênicas para IL-6. Estes resultados sugerem que células C2C12 diferenciadas podem constituir um bom modelo in vitro para o estudo do mecanismo de ação das PLA2s dos venenos animais. Instituição de fomento: FAPERJ CNPq Trabalho de Iniciação Científica Palavras-chave:  B. atrox; Fosfolipases A2; Miotoxidade Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005