IMPRIMIR VOLTAR C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 1. Biologia Molecular CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS AMBIENTAIS DE Cryptococcus neoformans Marília Gabriella Alves Goulart Perira 1, Amanda Latércia Tranches Dias 2, Claudete Rodrigues Paula 3, Antônio Martins de Siqueira 4 e Marília Caixeta Franco 5 1 - Departamento de Ciências Biológicas - Efoa-Ceufe 2 - Departamento de Ciências Biológicas - Efoa-Ceufe 3 - Universidade de São Paulo - USP-SP 4 - Departamento de Ciências Biológicas - Efoa-Ceufe 5 - Departamento de Ciências Biológicas - Efoa-Ceufe , ESCOLA DE FARMÁCIA E ODONTOLOGIA DE ALFENAS - CENTRO UNIVERSITÁRIO FEDERAL - EFOA-CEUFE Cryptococcus neoformans é o principal agente etiológico da criptococose, micose que afeta principalmente o sistema nervoso central humano. O sistema de “mating-type” (MAT) de C. neoformans é controlado por um locus com dois alelos funcionais alternativos, MATa e MATµ. Essa região genômica é altamente complexa e constituída por vários genes essenciais para o cruzamento e morfogênese, incluindo o gene do feromônio. O locus para MAT tem sido identificado como um potencial fator de virulência, sendo importante em estudos epidemiológicos e evolutivos. O objetivo desse estudo foi a caracterização molecular de isolados ambientais de C. neoformans quanto ao “mating-type”. Foram caracterizadas nove amostras ambientais de C. neformans isoladas na zona urbana e zona rural de Alfenas–MG, pertencentes a Micoteca de Micologia do Laboratório de Microbiologia e Imunologia da Efoa/Ceufe, duas amostras ambientais de C. neformans isoladas da região Sul do país e seis amostras ambientais de C. neformans isoladas do Estado do Rio de Janeiro, pertencentes a micoteca do ICB-USP. As amostras foram mantidas em ágar Sabouraud, a temperatura ambiente, com repiques a cada mês. Para a extração do DNA genômico utilizou-se a metodologia empregando pérolas de vidro. As amostras foram submetidas à reação da polimerase em cadeia (PCR), para determinação dos "mating-types", utilizando primers específicos para o MATa e MATµ. Os produtos de PCR foram submetidos à eletroforese em gel de agarose a 90 volts por 40 minutos e visualizados sob luz UV. O DNA obtido na extração apresentou boa qualidade e concentração adequada para a análise. Verificou-se que o tamanho do produto de PCR amplificado corresponde ao esperado, de 117 pb (MATa) e 101 pb (MATµ). Das dezessete amostras analisadas apenas duas foram identificadas como MATa e quinze como MATa (88,2%). A análise de “mating” por PCR, feita pela primeira vez na Efoa/Ceufe, pode ser realizada rotineiramente, pois é menos laboriosa que a análise tradicional envolvendo cruzamento das amostras “in vitro”. Na análise realizada neste estudo, verificou-se que o percentual de isolados ambientais do tipo MATµ foi alto em relação aos isolados do tipo MATa e concorda com os dados da literatura, que também relata que o potencial de virulência do fungo relacionado ao “matingtype” está ligado a habilidade para formação de hifas e a formação de badiósporos, que se dispersam facilmente no meio ambiente. Apoio: FINEP e PIBIC/CNPq Instituição de fomento: PIBIC/CNPq Trabalho de Iniciação Científica Palavras-chave:  Cryptococcus neoformans; ambientais; molecular Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005