|
| C. Ciências Biológicas - 8. Genética - 5. Genética Vegetal |
|
| PRODUÇÃO E REGENERAÇÃO DE PROTOPLASTOS DE PALMA Nopalea cochenillifera Salm-Dick |
|
| Jessé Marques da Silva Júnior 1, Elisabete Lima de Santana 2, Antônio Veleriano Pereira dos Santos 3, Eurico Eduardo Pinto Lemos 4 e Cícero Eduardo Ramalho Neto 5 |
|
| 1 - Depto. de Fitotecnia e Fotossanidade - CECA/UFAL
2 - Depto. de Zootecnia - CECA/UFAL
3 - Prof. Dr. do Depto. de Botânica - (colaborador) CCBI/UFAL
4 - Prof. Dr. do Depto. de Fitotecnia e Fitossanidade -(Colaborador) CECA/UFAL
5 - Prof. Dr. do Dept, UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS - UFAL |
|
| No presente trabalho foram utilizadas raquetes de Palma Forrageira (Nopalea cochenillifera Salm-Dick) com 5 cm de comprimento, as mesmas foram levadas ao Lab. de Biotecnologia Vegetal (BIOVEG) para serem tratadas com benlate 2,5g/l durante 10 minutos, solução de etanol a 50% por 1 minuto e em seguida foram imersas em uma solução de hipoclorito de sódio a 30% adicionado Twin, durante 30 mim. As raquetes foram seccionadas em fragmentos 1 cm sob condições assépiticas, inoculado-os em meio nutritivo MS (Murashige & Skoog,1962), suplementado com: vitaminas e açúcar 30g/L,utilizou-se a auxina 2,4-D (ácido diclorofenoxiacético) para a obtenção dos calos, outras raquetes foram submetidas a cortes longitudinais e retiradas fatia delgadas para expor as células do mesófilo e isolar os protoplastos. Foi utilizado ágar 7.0g/Le o pH foi ajustado para 5.8. Os explantes foram mantidos em sala de crescimento com temperatura de 24º C e alternância luminosa, permanecendo no meio de indução de calos durante 30 dias. Os protoplastos foram isolados a partir dos calos friáveis e das células do mesófilo do cladódio (raquete), estas células foram mergulhadas em solução de CPW0 durante 1 hora e logo em seguida imersas em solução de CPW 13 acrescido de enzimas de digestão para a degradação da parede celular, por 16 horas e liberação de protoplastos, as enzimas foram as seguintes: 200mg de Macerozyme R-10, 100mg de Driselase, 1000mg de Celulase Onozuca R- 10, 13g de Manitol, 1000mg de MES dissolvidas em 200ml de CPW0 com pH de 5.8, filtrados a vácuo.
Para a regeneração dos protoplastos utilizou-se o meio MS acrescido de 5mg/l de BAP (Benzillaminopurina), pelo método de isolamento de protoplastos via células do mesófilo, o qual foi o mais eficiente quando comparado ao método via calos.
|
|
|
Instituição de fomento: CNPq
| |
|
Trabalho de Iniciação Científica
|
|
| Palavras-chave:
Protoplastos; Enzimas; Palma Forrageira |
|
Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005
|