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C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 1. Biologia Molecular
EFEITO DA CANAMICINA SOBRE A INDUÇÃO DE EMBRIOGÊNESE SOMÁTICA SECUNDÁRIA NA MANDIOCA (Manihot esculenta Crantz)
Fabíola Fernandes Heredia 1 (fabiolafh@yahoo.com.br), Juliana Nogueira Brasil 2, Terezinha Feitosa Machado 3 e Francisco de Assis Paiva Campos 2
(1. Depto. de Bioquímica e Biologia Molecular - Universidade Federal do Ceará - UFC; 2. Depto. de Biologia, Curso de Ciências Biológicas - Universidade Federal do Ceará - UFC; 3. Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária - EMBRAPA-CNPAT)
INTRODUÇÃO:
A mandioca é uma das dez mais importantes plantas cultivadas, constituindo, juntamente com o arroz, milho e cana-de-açúcar, uma importante fonte de calorias para as populações de países tropicais. Atualmente, mais de 600 milhões de pessoas consomem produtos de mandioca em sua dieta base. Desta forma, pode-se evidenciar a importância em aplicar a este grupo de plantas as novas técnicas de melhoramento genético via transferência de genes. Nesse sentido, o desenvolvimento de um sistema de regeneração que permita a obtenção de plantas transgênicas a partir de células geneticamente modificadas, assim como estudos que permitam identificar as condições necessárias à seleção dos transformantes após a transferência de genes, tornam-se imprescindíveis. Protocolos de regeneração, tanto por embriogênese somática quanto por organogênese, foram desenvolvidos pelo Laboratório de Biologia Molecular de Plantas da Universidade Federal do Ceará para diversas cultivares de mandioca do Nordeste brasileiro. Nós apresentamos aqui estudos relacionados com a determinação da concentração de canamicina capaz de inibir a indução de embriogênese somática secundária a partir de cotilédones verdes de embriões somáticos da mandioca.
METODOLOGIA:
Cotilédones verdes de embriões somáticos da cultivar Rosinha; foram seccionados em pedaços de aproximadamente 4 mm2 e estes segmentos foram transferidos para meio de cultura constituído de sais e vitamina MS, (sulfato de cobre 2μM, sacarose 2%, agar 0,8%, pH 5,85) acrescido de 8 mg.L-1 de picloram e canamicina nas concentrações 0,0 – 0,05 – 0,5 – 1,0 – 2,5 – 5,0 – 10,0 – 20,0 e 50,0 mg.L-1. Após três semanas de incubação no escuro a de 25  2 °C, a freqüência de embriogênese somática em cada um dos tratamentos foi avaliada.
RESULTADOS:
Os explantes cultivados em meio de indução suplementado com canamicina, mostraram baixa tolerância a este antibiótico. Isto ficou evidenciado por uma drástica redução na freqüência de embriogênese somática a partir da concentração de canamicina de 2,5 mg.L-1 onde a freqüência de embriogênese somática foi de 26,79%. A indução de embriogênese somática foi totalmente inibida a partir de uma concentração de canamicina de 10 mg.L-1. Foi observado ainda que nos tratamentos com concentrações de canamicina variando de 1,0 mg.L-1 a 20 mg.L-1, havia uma grande produção de calo na superfície dos explantes. Esta produção de calo no entanto não foi observada no tratamentos onde a concentração de canamicina era de 50 mg.L-1.
CONCLUSÕES:
Dessa maneira, podemos concluir que embora a adição de canamicina a baixas concentrações (1,0; 2,5; 5,0; 10 e 20 mg.L-1) ao meio de indução de embriogênese somática iniba a produção de embriões somáticos, a produção de calo nos explantes indica que nestas concentrações este antibiótico não pode ser utilizada como agente seletivo em experimentos de transformação genética. Uma seleção eficiente poderá ser obtida apenas em concentrações de 50 mg.L-1.
Instituição de fomento: CNPq - Centro Nacional de Pesquisa
Palavras-chave:  Manihot esculenta; canamicina; seleção.
Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005