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| D. Ciências da Saúde - 5. Farmácia - 6. Farmácia | ||
| PESQUISA DE BETALACTAMASES DE ESPECTRO ESTENDIDO (ESBL) EM BACILOS GRAM NEGATIVOS ISOLADOS DE PACIENTES DO HOSPITAL UNIVERSITÁRIO DA UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA | ||
| Lucy Maria Bez Birollo Parucker 1 (lubbp@bol.com.br), Márcia Teixeira Pinto 1, Ana Cláudia Campos 1 e Danilo Braz 1 | ||
| (1. Depto. de Análises Clínicas / Centro de Ciências da Saúde / Universidade Federal de Santa Catarina) | ||
| INTRODUÇÃO:
O uso indiscriminado de agentes antimicrobianos estimula o desenvolvimento de novos mecanismos de resistência de bactérias, resultando em freqüente fracasso terapêutico. Dentre os microorganismos que sofreram modificações na sensibilidade aos antibióticos, estão as bactérias não fermentadoras (Pseudomonas aeruginosa), importante agente de infecções nosocomiais, sendo esta um patógeno resistente aos betalactâmicos. A detecção dos mecanismos de resistência constitui-se numa das tarefas mais importantes e difíceis do Laboratório de Microbiologia Clínica, devido às metodologias empregadas na rotina laboratorial. Detectar a produção de ESBL ainda é um grande desafio para os laboratórios, uma vez que os métodos de triagem utilizados para diagnóstico dessas cepas baseiam-se no perfil de sensibilidade da bactéria. Suspeita-se da produção de ESBL por uma cepa bacteriana quando, no antibiograma, há redução na sensibilidade aos agentes usados na sua triagem. Nosso objetivo visa contribuir para determinar sua ocorrência; o perfil de suscetibilidade das bactérias não fermentadoras isoladas nos materiais biológicos submetidos à cultura no Laboratório de Análises Clínicas do Hospital Universitário (HU); a incidência de cepas multirresistentes e detectar as bactérias produtoras de ESBL, obtendo melhor escolha de estratégias terapêuticas em doenças causadas por bacilos Gram negativos não fermentadores, contribuindo assim para o controle das infecções hospitalares do HU. |
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| METODOLOGIA:
No período de março a junho de 2003, foram coletadas as bactérias não fermentadoras encontradas em amostras biológicas de pacientes atendidos no ambulatório, na emergência e de pacientes internados. As bactérias foram identificadas e submetidas ao teste de sensibilidade aos antimicrobianos (TSA), segundo a técnica de Kirby e Bauer. Os testes para a pesquisa de ESBL foram realizados no Laboratório Didático da disciplina de Microbiologia Clínica da UFSC e o método de escolha foi o da Dupla Difusão do Disco, segundo normas recomendadas pelo NCCLS. As cepas coletadas foram conservadas em caldo BHI, sob refrigeração de 2ºC a 8ºC. Os microorganismos foram reisolados em ágar Mc Conkey, para obtenção de colônias com 24 horas para realização do teste da dupla difusão e das seguintes provas bioquímicas adicionais: crescimento em ágar Cetrimide, OF glicose, OF maltose, OF lactose, OF xilose e crescimento em BHI a 37°C e a 42°C. Essas cepas foram então inoculadas em placa com ágar Mueller-Hinton a partir de uma suspensão com turvação igual a do tubo 0,5 da escala de Mac Farland. Após a inoculação, discos de 30µg de aztreonam, ceftazidima, cefotaxima e ceftriaxona foram colocados à 25mm de um disco central de amoxacilina + ácido clavulânico (20:10µg). Após incubação de 24 horas a 37ºC, um aumento do halo de inibição ou aparecimento de zona fantasma em pelo menos um dos antimicrobianos em direção ao centro foi considerado positivo para ESBL. |
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| RESULTADOS:
Trinta cepas de bacilos Gram negativos não fermentadores foram isoladas de pacientes do HU e submetidas a testes de suscetibilidade e pesquisa de ESBL. Pseudomonas aeruginosa foi a bactéria de maior incidência (90%), seguida de Acinetobacter baumanii (10%) e urina foi o material de maior importância, tendo contribuído com 46,66% dos isolados, concordando com os dados publicados na literatura específica. Produção de ESBL foi observada em 15% das cepas isoladas e em 35% observou-se a produção de betalactamases tipo Amp C. A indução de betalactamase cromossômica induzível tipo Amp C ocorreu em decorrência da exposição dos microrganismos a amoxicilina. A produção de ESBL foi detectada por um aumento na zona de inibição entre o disco contendo amoxicilina-ácido clavulânico e um ou mais dos discos contendo antibióticos. O perfil de multirresistência foi observado em todos os bacilos isolados, em maior ou menor grau, tanto em P. aeruginosa como em A. baumanii. |
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| CONCLUSÕES:
Nesse trabalho, todas as cepas de BGN-NF isoladas demonstraram perfil de multirresistência a antimicrobianos, inclusive a antibióticos citados na literatura como eficientes contra P. aeruginosa e A. baumanii (cefepime, imipenem, fluoroquinolonas, ceftazidima, entre outros). O teste da Dupla Difusão do Disco demonstrou ser prático e eficiente quando realizado após avaliação criteriosa do antibiograma e pode ser útil no monitoramento das taxas de produção de ESBL e outros mecanismos de resistência, como ativação do gen Amp C, em ambiente hospitalar. Embora o antibiograma seja inadequado para a detecção de ESBL, sua leitura e interpretação correta é uma excelente forma de acompanhamento dos padrões de resistência de amostras bacterianas e de triagem para pesquisa de ESBL. O sucesso terapêutico depende, principalmente, da acurácia do laudo microbiológico, auxiliando o clínico na realização de um tratamento adequado e eficaz, porém, de maior relevância, destaca-se a função deste laudo no controle das infecções hospitalares. A correta e minuciosa identificação dos microrganismos, determinação dos perfis de suscetibilidade e detecção de mecanismos de resistência, permitirá à Comissão de Controle de Infecção Hospitalar a tomada de medidas tanto para reduzir a circulação das bactérias como na elaboração de protocolos de tratamento, selecionando antimicrobianos de maior eficácia para o paciente e menor impacto na pressão seletiva sobre os microrganismos. |
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| Palavras-chave: Mecanismo de resistência bacteriana; Betalactamases; ESBL. | ||
| Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005 |