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C. Ciências Biológicas - 8. Genética - 4. Genética Molecular

ANÁLISE QUALITATIVA DA EXPRESSÃO DOS GENES PSMA E PSA EM SANGUE PERIFÉRICO DE PACIENTES COM CÂNCER DE PRÓSTATA E HIPERPLASIA PROSTÁTICA BENIGNA

Adriana Freitas Neves 1, Elizangela Rosa Cordeiro 1, Weruska Karina Freitas Santos 1, Karina Marangoni 1, Paula Cristina Faria 1, Isabela Cardoso Fontoura 1, Thaise Gonçalves Araújo 1 e Luiz Ricardo Goulart 1

(1. Instituto de Genética e Bioquímica / Universidade Federal de Uberlândia / INGEB-UFU)

INTRODUÇÃO: O câncer de próstata (CaP) representa um sério problema de saúde pública no Brasil, em função de suas altas taxas de incidência e mortalidade. É uma doença caracterizada por aberrações genéticas. Muitas destas mutações são adquiridas, outras são herdadas, o que resulta na predisposição ao câncer, embora mais de 90% são considerados esporádicos. Atualmente, vários marcadores moleculares em sangue periférico têm sido testados para o aprimoramento do diagnóstico, objetivando principalmente a detecção de células tumorais circulantes, permitindo inclusive monitorar o tratamento da doença. Entre eles estão o PSMA e o PSA.O PSMA (Antígeno Prostático Específico de membrana) codifica uma proteína transmembrana tipo II, sendo altamente expressa em carcinomas prostáticos e metastáticos, além de apresentar baixa ou nenhuma expressão em HPB (hiperplasia prostática benigna). O PSA (antígeno prostático específico) é o marcador prostático sérico mais utilizado para detectar alterações na próstata. Ele codifica a Calicreína tipo III presente no plasma seminal, podendo sua expressão ser detectada em sangue periférico. Sua expressão nestas condições pode chegar a ser 30 vezes maior do que em tecidos prostáticos normais ou com presença de hiperplasia benigna (HPB). O presente estudo teve como objetivos, analisar a presença ou ausência da expressão dos genes PSA e PSM, para observar se há associação destes biomarcadores com o Câncer de Próstata.

METODOLOGIA: A análise qualitativa da expressão dos genes PSA e PSMA foi feita através da técnica RT-PCR nested qualitativa em amostras de 54 pacientes cedidas pelo Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia. Essas amostras foram coletadas mediante autorização dos pacientes, os quais assinaram um Temo de Consentimento. O procedimento foi realizado dentro da rotina do setor cirúrgico, sem causar desconforto adicional ao paciente. A técnica de RT-PCR nested qualitativa consiste em, inicialmente, uma reação de transcrição reversa (RT), para síntese de cDNA (DNA complementar), a partir do RNA total extraído dos pacientes, conforme protocolo otimizado no Laboratório de Genética Molecular da Universidade Federal de Uberlândia. Para um controle interno da reação e monitoramento da qualidade do cDNA formado, foram utilizados primers de um gene constitutivo, a 2-microglobulina. Em seguida foi feita a PCR (Reação em cadeia da Polimerase), usando uma alíquota (4 μL) do cDNA recém-sintetizado usando primers nested dos genes PSA e PSMA.Os fragmentos foram analisados em gel de agarose (1,5%).Esses géis foram visualizados por fluorescência e documentados em VDS (videodocumentação), para detecção da presença ou ausência da expressão dos genes nos pacientes.

RESULTADOS: Os resultados observados indicam que nenhuma correlação foi encontrada entre a presença dos genes analisados e o CaP, entretanto a expressão do gene PSA correlaciona-se com o estadiamento TNM (r = -0.66; P< 0.05) e a presença do gene PSMA está associado com os valores de PSA pós-biópsia (r = -0,47; P< 0.05) de acordo com a correlação de Spearman. Os dados obtidos sugerem associação positiva entre a presença do RNAm do gene PSA no sangue periférico e os estágios iniciais do câncer de próstata.

CONCLUSÕES: Os resultados sugerem que a utilização de ambos os marcadores PSA e PSMA em sangue periférico permite a discriminação de pacientes em estágios iniciais da doença, bem como a detecção do adenocarcinoma prostático com margens cirúrgicas comprometidas, respectivamente, podendo auxiliar na avaliação clínica sobre a escolha da terapêutica mais apropriada.

Instituição de fomento: CAPES, CNPq, FAPEMIG, INGEB-UFU

Palavras-chave:  câncer de próstata; biomarcadores; antígeno prostático específico de membra.

Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005