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| E. Ciências Agrárias - 5. Medicina Veterinária - 5. Reprodução Animal | ||
| FOLÍCULOS OVARIANOS PRÉ-ANTRAIS ISOLADOS DE GATA DOMÉSTICA EXPOSTOS A DIFERENTES CRIOPROTETORES | ||
| Andreia Farias Evangelista 1 (andreiafariase@yahoo.com.br), Daniele Mangueira Sales 1, Ana Kelen Felipe Lima 1, Cláudio Afonso Pinho Lopes 1, José Ricardo de Figueiredo 1 e Lúcia Daniel Machado da Silva 1 | ||
| (1. Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará - UECE) | ||
| INTRODUÇÃO:
O gato vem sendo utilizado como modelo experimental para conservação de felídeos ameaçados de extinção. Dentre as técnicas já desenvolvidas, a criopreservação de gametas constitui-se uma boa alternativa na formação de um banco de genoma. Para a criopreservação de folículos pré-antrais (FPA), faz-se uso de crioprotetores, que são solventes orgânicos utilizados sozinhos ou em associação e agem protegendo a célula durante o período de estocagem em baixas temperaturas. Entretanto, durante o processo de criopreservação, as células podem sofrer danos, não sendo conhecido o papel do agente crioprotetor na causa deste evento. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da exposição de FPA felinos, isolados, a quatro diferentes crioprotetores. |
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| METODOLOGIA:
Foram utilizados 10 ovários de gatas adultas SRD. Inicialmente, um pequeno fragmento (aproximadamente 1/6) do ovário foi retirado e imediatamente fixado em formol 10% para análise histológica, correspondendo ao Tratamento Controle (TC). O restante do ovário foi destinado ao isolamento folicular conforme procedimento descrito por LIMA et al. (2003). Imediatamente após o isolamento folicular, uma alíquota contendo folículos pré-antrais (FPA) isolados foi destinada à avaliação da integridade folicular, com o azul de Trypan. Em seguida, cinco amostras de 0,9 ml da suspensão folicular foram retiradas e transferidas para cinco tubos Eppendorf separadamente, as quais foram adicionadas da mesma quantidade de MEM na ausência de crioprotetor (T1) ou na presença de glicerol (GLI), etilenoglicol (EG), dimetilsulfóxido (DMSO) ou propanodiol (PROH), todos na concentração final de 1,5 M, correspondendo aos Tratamentos 2 a 5 (T2 a T5), e equilibradas a 20ºC por um período de 20 min. Ao final do período de exposição, foi realizada a remoção do crioprotetor, onde cada suspensão de folículos foi transferida para um tubo Eppendorf e submetida a três lavagens sucessivas por centrifugação (1000 rpm/2 min) em 1 ml de MEM à temperatura ambiente, realizadas em intervalos de 5 min. Após a última lavagem, os folículos foram ressuspensos em 0,5 ml de MEM e corados para avaliar a sua integridade. O número médio de FPA morfologicamente normais foi comparado entre os tratamentos utilizando o teste T de Student a uma probabilidade de 5%. |
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| RESULTADOS:
Foram contados 900 FPA, em que foi observado um percentual de 99,33% FPA normais no grupo controle. Este resultado foi estatisticamente semelhante ao grupo sem crioprotetor (95,33%), e significativamente superior a todos os outros em que os FPA foram expostos aos crioprotetores, ou seja, 79,33%, 91,33%, 94% e 93,33% FPA quando utilizado o GLI, EG, DMSO e PROH, respectivamente. Vale ressaltar que apenas o GLI apresentou diferença significativa dos demais. |
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| CONCLUSÕES:
Com base nos resultados obtidos, conclui-se que os crioprotetores EG, DMSO e PROH possuem atividade semelhante durante o período de exposição e que o GLI reduz o percentual de FPA normais. |
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| Instituição de fomento: FUNCAP | ||
| Trabalho de Iniciação Científica | ||
| Palavras-chave: Exposição ao Crioprotetor; Felis catus; Folículos pré-antrais isolados. | ||
| Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005 |