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| C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 5. Química de Macromoléculas | ||
| Caracterização in silico da presença de sítios de interação em inibidores de papaína e tripsina de sementes de Prosopis juliflora, Acácia confusa e Adenanthera pavonina | ||
| Ludovico Migliolo 1 (ludovico28@gmail.com), Rodrigo Aquino de Oliveira 1, Adeliana Silva de Oliveira 1, 3, Elizeu Antunes dos Santos 1, Maurício Pereira de Sales 2 e Alexandre Flávio Silva de Queiroz 1 | ||
| (1. Depto. Bioquímica, Universidade Federal do Rio Grande do Norte - UFRN; 2. Depto. Biofísica e Farmacologia, Universidade Federal do Rio Grande do Norte - UFRN; 3. Depto. Bioquímica e Biologia Molecular, Universidade Federal do Ceará - UFCE) | ||
| INTRODUÇÃO:
Inibidores protéicos vegetais têm a capacidade de suprimir a atividade de enzimas proteolíticas in vitro e in vivo. Eles são classificados de acordo com a classe de enzimas que inibem: inibidores de proteinases serínicas, cisteínicas, aspatícas e de metalo proteinases. Atualmente são descritas 7 famílias de inibidores de proteinases serínicas, entretanto a família Kunitz é a mais estudada. Essa família consiste de proteínas com massa molecular de 20kDa, 2 pontes dissulfeto, e o sítio de interação com tripsina consiste de um resíduo de arginina. Recentemente, os inibidores de proteinases cisteínicas vegetais (Fitocistatinas) têm recebido especial atenção. Os inibidores desta família apresentam três regiões de interação com papaína, um resíduo de glicina, próximo ao N-terminal, um pentapeptídio central (QVVAG), e um resíduo de triptofano próximo ao C-terminal. Inibidores do tipo Kunitz não apresentam essas regiões de interação e inibem papaína. O inibidor de papaína tipo Kunitz de Prosopis juliflora, que inibe fracamente a tripsina, possui na sua estrutura primária sítios de interação para a papaína (Arg64, Trp60, Glu89 e Glu109) e tripsina (Arg64), sendo caracterizado como um inibidor bifuncional. Recentemente foi relatado que o inibidor de tripsina tipo Kunitz isolado de Adenanthera pavonina também inibe a papaína. Inibidores do tipo Kunitz de P. juliflora, de A. confusa e de A. pavonina apresentam grande similaridade em suas seqüências primárias variando entre 60-80%. |
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| METODOLOGIA:
Partindo desses achados, esse trabalho tem como objetivo determinar se os sítios de interação para tripsina/papaína de P. juliflora são encontrados também em A. confusa e A. pavonina. De posse da seqüência primária de aminoácidos da P. juliflora, de A. confusa e de A. pavonina um alinhamento pelo programa CLUSTALW foi realizado. |
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| RESULTADOS:
Os resultados mostraram que o resíduo de aminoácido na posição Arg64, de interação da tripsina, foi conservado nas três seqüências dos inibidores e que os sítios de interação para papaína, como resíduo Trp60 de P. juliflora, foi encontrado em A. confusa, mas em A. pavonina um resíduo de Ser substituía o Trp60, porém este resíduo apresenta uma provável identidade nucleotídica de 66% com Ser. O segundo resíduo Glu89 de P. juliflora, foi encontrado substituído por outro aminoácido ácido em A. pavonina, o Asp89. O terceiro resíduo de interação à papaína, Glu109, estava presente nas três seqüências |
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| CONCLUSÕES:
1. Os inibidores de P. juliflora, A. pavonina e A. confusa são inibidores tipo Kunitz, pois compartilham sítios de interação para tripsina (Arg64). 2. A bifuncionalidade (inibição de tripsina/papaína) dos inibidores de P. juliflora, A. pavonina foi comprovada pelo alinhamento feito pelo programa CLUSTALW, pois os sítios de interação para papaína foram conservados nas posições e Arg64, Glu109 e duas substituições foram observadas Glu89(Asp89) e Trp60(Ser60). 3. No alinhamento com o inibidor bifuncional de P. juliflora e o de A. confusa foram conservados todos os sítios de interação para papaína. |
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| Instituição de fomento: CNPq, CAPES | ||
| Trabalho de Iniciação Científica | ||
| Palavras-chave: Inibidor bifuncional; Kunitz; Inibidor de papaína. | ||
| Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005 |