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| D. Ciências da Saúde - 5. Farmácia - 1. Análise de Controle de Medicamentos | ||
| DESENVOLVIMENTO E VALIDAÇÃO DE METODOLOGIA ANALÍTICA POR CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA (CLAE) PARA QUANTIFICAÇÃO DOS QUASSINÓIDES DO LENHO DA Picrasma crenata (VELLOZO) ENGLER | ||
| Marcelo Shigueru Kamei 1 (mskamei@pop.com.br), Mara Lane Carvalho Cardoso 2, Marli Miriam de Souza Lima 2 e Cláudio Roberto Novello 3 | ||
| (1. Estagiário/PIBIC lab. de Farmacognosia, Universidade Estadual de Maringá-UEM; 2. Profa. Dra. Depto Farmácia e Farmacologia, Universidade Estadual de Maringá-UEM; 3. Técnico Msc. Lab. de Farmacotécnica, Universidade Estadual de Maringá-UEM) | ||
| INTRODUÇÃO:
Picrasma crenata, pertencente a família da Simaroubaceae, é popularmente conhecida como pau-tenente. É uma árvore ou arvoreta de 2 a 12 m de altura, cuja madeira possui cor levemente amarelada de gosto extremamente amarga, características principais para o seu reconhecimento. As simaroubáceas tornaram-se amplamente conhecidas pelas propriedades biológicas associadas aos seus constituintes amargos, os quassinóides. O interesse por esta planta é devido ao seu uso popular para o tratamento de várias doenças importantes como hipertensão, perturbações gástricas e diabetes. Acredita-se que os quassinóides presentes são os responsáveis pelos efeitos curativos da planta. Assim o objetivo deste trabalho na quantificação dos quassinóides em quassina, utilizando CLAE. |
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| METODOLOGIA:
O caule proveniente da região de Carangola -MG, foi seco, moído e acondicionado em saco plástico. Realizou-se a turbólise utilizando-se água fria como solvente, nas proporções 5% (solução extrativa). Posteriormente realizou-se filtração e o volume foi completado para 100 mL. O extrato 5% foi liofilizado, sendo parte dele retomado com mistura metanol:água 50:50 v/v (solução mãe) Partindo dessa solução, obteve-se por diluição 5 amostras que foram aplicadas no cromatógrafo (alça de 20µL) com auxílio de microsseringa com capacidade para 100µL. O sistema cromatográfico empregado foi: gradiente com água:metanol, fluxo de 1,0 mL/min e temperatura ambiente. Cada ponto foi avaliado com 3 repetições. Realizou-se teste de especificidade, linearidade, intervalo, limite de detecção, limite de quantificação, teste de exatidão e teste de repetibilidade. |
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| RESULTADOS:
A especificidade e a seletividade foram avaliadas pela análise dos cromatogramas da solução extrativa, comparando-a com o cromatograma da mistura de quassinóides isolados previamente. Os cromatogramas apresentaram alta resolução dos picos de quassina, β-neoquassina, paraína, α -dihidronorneoquassina, indicando que o método proposto pode ser aplicado para a determinação da seletiva destes quassinóides em Picrasma crenata. A linearidade foi determinada pela curva de calibração obtida pelos resultados obtidos pelo CLAE, para quassina padrão e solução extrativa da amostra na faixa de concentração entre 13,13 - 100 µg/mL. O limite de detecção foi baseado na relação de 3 vezes o ruído da linha de base.A precisão (repetibilidade e reprodutibilidade) foi demonstrada com CV de 0,90% na concentração de 2,282 (mg/mL) de droga na solução, o que corresponde a 62,79 µg/mL de quassina. O CV médio da curva foi expresso em 3,65%, este resultado é considerado satisfatório, uma vez que estamos tratando de um produto fitoterápico que por sua vez é tratado como matriz complexa, onde a faixa de variação aceita está entre 3-6%. A precisão intermediária desta amostra apresentou um CV% de 2,33% para o Analista I e 3,65% para o Analista II, demonstrando alta reprodutibilidade das áreas de quassina. A exatidão do método por CLAE para os ensaios de análise de recuperação foi de determinada adicionando à amostra com concentração de 6,52 mg/mL da solução extrativa liofilizada, quantidades de 120, 600 e 960 µg de quassina padrão. As recuperações da quassina adicionadas para estas soluções foram respectivamente: 108,6%, 102,9% e 108,0% de quassina. |
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| CONCLUSÕES:
O método baseado em CLAE fase reversa mostrou-se eficiente para a separação dos quassinóides do lenho da Picrasma crenata. Os testes para validação foram realizados seguindo-se a RE nº 899, de 29 de maio de 2003, da ANVISA. A resolução dos cromatogramas das soluções extrativas apresentaram alta resolução dos picos referentes aos quassinóides, indicando que o método proposto pode ser utilizado na determinação seletiva dos quassinóides do lenho da Picrasma crenata. |
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| Palavras-chave: Picrasma crenata; Validação de metodologia analítica por C; Simaroubaceae. | ||
| Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005 |