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| C. Ciências Biológicas - 7. Fisiologia - 1. Fisiologia Celular e Molecular | ||
| ESTUDO SOBRE A PRESENÇA DE ATIVIDADE HEMOLÍTICA NO EXTRATO BRUTO DA ANÊMONA Bunodosoma cangicum (BELÉM & PRESLERCRAVO, 1973), ESPÉCIE DE ENCONTRADA NO LITORAL DO CEARÁ | ||
| Samuel de Lima Comaru 1 (samuelcomaru@yahoo.com.br), Cibele Vasconcelos de Oliveira 3, José Eduardo Ribeiro Honório Júnior 1, Silvania Maria Mendes de Vasconcelos 1, Krishnamurti de Morais Carvalho 1 e Bruno Andrade Cardi 1, 2 | ||
| (1. Lab. de Toxinologia e Neurofarmacologia-Inst. Ciências Biomédicas-Universidade Estadual do Ceará; 2. Lab. de Animais Peçonhentos-Inst. Ciências Biomédicas-Universidade Estadual do Ceará; 3. Lab. de Fisiologia Experimental-Inst. Ciências Biomédicas-Universidade Estadual do Ceará) | ||
| INTRODUÇÃO:
Anêmonas marinhas (Cnidaria, Anthozoa) são animais que apresentam organelas especiais (cnidócitos) em seus tentáculos, que liberam toxinas quando estimuladas química ou mecanicamente. Essas toxinas podem ser divididas em duas classes, a saber, as que interagem com canais iônicos dependentes de voltagem e as que agem sobre membranas plasmáticas, alterando a morfofisiologia das mesmas. Estas últimas, chamadas citolisinas ou actinoporinas vêm sendo alvo de vários estudos e são distribuídas em 4 grupos, a saber, I – peptídeos (5-8 kDa) com atividade anti-histamínica; II – proteínas (~20 kDa) formadoras de poros e inibidas pela esfingomielina; III – citolisinas (30-40 kDa) com ou sem atividade tipo fosfolipase A2,; e IV – um possível grupo de proteínas, até agora, representado apenas por uma citolisina de 80 kDa presente em Metridium senile. No presente trabalho apresentamos dados sobre a atividade citolítica in vitro do extrato bruto de B.cangicum, utilizando hemácias de camundongos como modelo. |
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| METODOLOGIA:
Espécimes de B. cangicum adultos foram coletados ao longo da costa Norte de Fortaleza (CE), por meio de coleta manual, com imersão imediata em banho de gelo. No laboratório, os animais foram homogeneizados em liqüidificador usando água bidestilada como diluente (1:5 p:v). Após decantação, o sobrenadante foi centrifugado (17.000 x g, 60 minutos, 4°C) e o sobrenadante resultante foi liofilizado e estocado a -20ºC. O pó liofilizado foi reconstituído e, amostras do extrato em diferentes concentrações (0.02 mg/ml; 0.04 mg/ml; 0.08 mg/ml; 0.16 mg/ml; 0.32 mg/ml) foram ensaiadas com hemácias lavadas de camundongos a 5% em PBS pH 7.4 (50μl de amostra de extrato + 450μl de hemácia a 5%), à temperatura ambiente (±27°C). Após 2 e 3 horas de incubação, as amostras foram centrifugadas a 5000 x g por 15 minutos e a liberação de hemoglobina foi determinada por leitura espectrofotométrica a 541nm. Os resultados foram analisados pelo sofware GraphPadPrism®. |
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| RESULTADOS:
Utilizando a metodologia citada, evidenciamos atividade citolítica do extrato de forma crescente de acordo com o aumento da concentração do extrato (0.02 mg/ml a 0.32 mg/ml). Comparativamente com o controle positivo (100% de hemólise – por imersão em solução hipotônica), observou-se cerca de 25% da atividade hemolítica quando o extrato de B. cangicum foi ensaiado com solução com concentração de 0.08 mg/ml; uma porcentagem mediana (45-50%) de hemólise foi obtida quando hemácias foram incubadas com solução de 0.16 mg/ml do extrato bruto de B. cangicum. Atividade hemolítica máxima (85%) foi obtida com a concentração de 0.32 mg/ml. |
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| CONCLUSÕES:
Nossos resultados apontam para a presença de componente (s) com atividade citolítica no extrato de B. cangicum, possivelmente do grupo das citolisinas, como já evidenciado em outras espécies de anêmonas. Estudos subsequentes vêm sendo desenvolvidos no sentido de purificar o(s) componente(s) citotóxico(s), objetivando elucidar o mecanismo de ação sobre membrana celular, bem como investigar o seu uso como um possível agente antimicrobiano. |
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| Instituição de fomento: FUNCAP | ||
| Trabalho de Iniciação Científica | ||
| Palavras-chave: Bunodosoma cangicum; Atividade hemolítica; Anêmona marinha. | ||
| Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005 |