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| C. Ciências Biológicas - 13. Parasitologia - 5. Protozoologia de Parasitos | ||
| CARACTERIZAÇÃO DA VIA METABÓLICA DO CHIQUIMATO (3,4,5-TRIHIDROXI-1-CICLOHEXENO-1-CARBOXILATO) EM Leishmania (Viannia) braziliensis | ||
| Deise da Silva Jacques 1, Renata da Silva Ribeiro 1, Paulo Vitor da Silva e Souza 1, Felipe Baggio Vianna 1, Kelly Costa de Almeida 1, Rodrigo Nunes Rodrigues da Silva 1 e Ronald Bastos Freire 1 | ||
| (1. Dep. Biologia Animal, Inst. Biologia, Univ. Federal Rural do Rio de Janeiro - UFRRJ) | ||
| INTRODUÇÃO:
O presente trabalho teve por objetivo a detecção da via metabólica do chiquimato em Leishmania (Viannia) braziliensis. Para tanto foi utilizada a cepa 575 de L. braziliensis, cujo cultivo foi acrescido de N-fosfonometilglicina (glifosato), um inibidor competitivo da sétima enzima da via metabólica do chiquimato (5-fosfoenol-piruvil-chiquimato-3-fosfato-sintase). |
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| METODOLOGIA:
A viabilidade de promastigotas, mantidos sob cultivo, foi medida através da contagem hemocitométrica do número relativo de parasitas em meio axênico, por diferentes períodos de tempo, assim como pelo ensaio de exclusão de corante vital (Azul de Trypan). A atividade enzimática mitocondrial foi avaliada através do ensaio de desdobramento do azul de Tetrazólio (MTT). Os protozoários tratados foram, também, submetidos a cultivo em ausência de interferentes para avaliação da atividade parasiticida. Ensaios de toxidez, realizados em cultivos de hepatócitos e de macrófagos, serviram para se estimar a seletividade do estresse metabólico induzido pelo glifosato. As alterações morfológicas decorrentes do tratamento foram avaliadas através de microscopia ótica e microscopia eletrônica de transmissão. Extratos de plantas medicinais, com ação sobre Trypanosoma cruzi foram utilizados para confirmar ação antiparasitária observada. |
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| RESULTADOS:
A ação letal foi observada pela exposição de 104 promastigotas a 0,39 mM de glifosato por 24 horas. A exposição a 0,02 mM de glifosato originou efeitos similares entre 1 e 150 minutos, com paralisação dos movimentos flagelares em 90-100% dos promastigotas, culminando com a morte após 180 minutos de exposição. A paralisia foi correlacionada com a ausência da atividade mitocondrial nos protozoários tratados. As alterações morfológicas observadas sugeriram morte por apoptose. O tratamento dos protozoários com extratos vegetais confirmaram ser o metabolismo energético um alvo de interesse para a seleção de fármacos antiparasitários a serem empregados no controle de protozoários parasitas. O tratamento com extratos de Hydrocotyle umbellata, possuidora de atividade antioxidante indicou um favorecimento ao desenvolvimento parasitário. Ao contrário, a ação de Solanum crinitum, com grande potencial para causar estresse metabólico e letal para Trypanosoma cruzi, evidenciou estresse metabólico nos promastigotas, que se apresentaram paralisados após 15 minutos de exposição a 0,5 mg.mL-1, com o aparecimento de intensa vacuolização citoplasmática , culminando com morte parasitária, após 30 minutos de exposição. Não foram observados efeitos tóxicos nas células de mamíferos expostas às concentrações de glifosato utilizadas. |
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| CONCLUSÕES:
Uma vez que o glifosato é seletivo para a via metabólica do chiquimato, pode-se depreender que em flagelados da família Kinetoplastidae, esta via metabólica está relacionada ao metabolismo energético mitocondrial e não à síntese de purinas, como ocorre em parasitos do filo Apicomplexa. Por não apresentar toxidez para células de mamíferos, sugerindo um elevado índice terapêutico, pode-se depreender que o 3,4,5-Trihidroxi-1-Ciclohexeno-1-Carboxilato pode ser a base para a formulação de novos fármacos para a leishmaniose tegumentar americana. |
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| Instituição de fomento: CNPq/CAPES | ||
| Trabalho de Iniciação Científica | ||
| Palavras-chave: kinetoplastidae; ácido chiquímico; metabolismo energético. | ||
| Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005 |