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C. Ciências Biológicas - 6. Farmacologia - 4. Farmacologia

LECTINA DE Araucaria angustifolia POSSUI ATIVIDADE ANTIEDEMATOGÊNICA INIBINDO A MIGRAÇÃO DE NEUTRÓFILOS EM RATOS

Mário Rogério Lima Mota ¹ (mariolmota@hotmail.com), Raphaela Cardoso Gomes ¹, Ana Vaneska Passos Meireles ¹, Alana de Freitas Pires ¹, Daniel Magalhães Gomes ¹, Michellle Soares Josino da Silva ¹, Benildo Sousa Cavada ², David Neil Criddle ¹, Ana Maria Sampaio Assreuy ¹ e Nylane Maria Nunes de Alencar ²

(1. Instituto Superior de Ciências Biomédicas, Universidade Estadual do Ceará - UECE; 2. Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular, Unicersidade Federal do Ceará - UFC)

INTRODUÇÃO:
Lectinas são proteínas que apresentam pelo menos um sítio de ligação não catalítico, que se liga de forma reversível e específica carboidratos, sendo este denominado domínio lectínico (Plant Physiol., v. 109, p. 347-352, 1995). Uma das estratégias de comprovação da participação do domínio lectínico nos diferentes processos de reconhecimento celular é a inibição do efeito da lectina pela adição de seu açúcar específico. Dependendo da via de administração utilizada, as lectinas de leguminosas apresentam potente ação antiinflamatória, inibindo os eventos celulares e vasculares da resposta inflamatória provavelmente através de competição pelos sítios de ligação das selectinas endógenas presentes nos leucócitos e/ou endotélio (Mediators Inflamm., v. 6, p. 201-210, 1997). Além da inibição de eventos inflamatórios agudos, estas lectinas previnem a lesão urotelial no modelo de cistite hemorrágica induzida por ciclofosfamida em camundongos (J. Urol., v.161, p. 1988-1993, 1999). Todos estes efeitos foram revertidos quando da associação destas lectinas com seus açúcares ligantes específicos. O objetivo do trabalho foi investigar o efeito da lectina de Gimnosperma Araucaria angustifolia (AaL), sobre o edema de pata induzido por carragenina (Cg), um estímulo inflamatório dependente de leucócitos, avaliando sua atividade sobre a migração de neutrófilos induzida por estímulos quimiotáticos diretos (fMLP) e indiretos (Cg).

METODOLOGIA:
A AaL foi isolada e purificada no Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular-UFC por cromatografia de afinidade em coluna de quitina (polímero de Glic-Nac). Foram utilizados ratos Wistar machos (150 e 250g), mantidos em ciclos de claro-escuro de 12h e manipulados de acordo com as diretrizes do Comitê de Ética em Pesquisa-UECE. No modelo de edema de pata, os volumes das patas de cada animal foram medidos pletismograficamente antes (tempo zero) e 0.5, 1, 2, 3 e 4 h após a administração de Cg. O edema foi calculado como a diferença entre o volume das patas em um determinado tempo após o estímulo e no tempo zero. AaL(0,01; 0,1 e 1 mg/kg; e.v.) foi administrada 30 min. antes da Cg (2 mg/pata; s.c. intraplantar) para testar seu potencial antiinflamatório. Além disso, a AaL foi administrada e.v. isoladamente ou em associação a seu açúcar ligante específico (Glic-Nac- 0,1M) e inespecífico (manose- 0,1M) para avaliar a participação do sítio lectínico neste efeito. No modelo de peritonite, os animais receberam Cg (300µg/cavidade) ou fMLP (44 ng/cavidade; i.p.) e 4h depois foram sacrificados por deslocamento cervical. O fluido peritoneal foi coletado e a contagem total e diferencial dos leucócitos realizada. Os valores foram expressos como a média ± E.P.M. do número de neutrófilos/µL do fluido peritoneal. AaL foi administrada (0,01; 0,1 e 1 mg/kg, e.v.) 30 min antes da injeção de Cg ou fMLP para a avaliação de sua atividade na inibição da migração de neutrófilos.

RESULTADOS:
A injeção subcutânea intraplantar de Cg (2 mg/pata) promoveu intenso edema de pata que atingiu um pico máximo na segunda hora, mantendo-se elevado até a quarta hora de desenvolvimento do edema. AaL (0,01; 0,1 e 1 mg/kg) injetada e.v. 30 min antes da administração de Cg, promoveu redução significativa do edema em todas as doses utilizadas, porém a inibição se mostrou mais eficiente na dose de 1mg/kg. A atividade inibitória da AaL sobre o edema de pata induzido por Cg (2mg/pata) foi prevenida de maneira parcial pela administração e.v. de uma solução contendo AaL (1mg/kg) e seu açúcar ligante específico ácido N-acetil-glicosamina (Glc-Nac; 0,1M). A solução contendo AaL (1mg/kg) e um açúcar ligante inespecífico, a Manose (Man; 0,1M) não promoveu nenhuma alteração significativa no efeito inibitório antiedematogênico da lectina. A migração de neutrófilos para a cavidade peritoneal de ratos foi aumentada significativamente 4 h após a administração i.p. de Cg (300g/cavidade) ou fMLP (44 ng/cavidade), quando comparado aos animais controle, que receberam salina i.p. AaL (0,01; 0,1 e 1mg/kg) administrada e.v. 30 min antes dos estímulos reduziu de forma bastante acentuada a migração de neutrófilos induzida por Cg em 69 e 92% e aquela induzida por fMLP em 66,2 e 87,2%, nas doses de 0,1 e 1 mg/kg, respectivamente.

CONCLUSÕES:
A lectina de sementes de Araucaria angustifolia injetada por via endovenosa apresentou uma eficiente atividade antiedematogênica no modelo experimental de edema de pata induzido por carragenina em ratos. Esta atividade parece ser dependente do domínio lectínico. Além disso, a AaL demonstrou uma excelente inibição da migração de neutrófilos no modelo de peritonite induzida tanto por estímulo quimiotático direto, quanto por indireto.

Instituição de fomento: Funcap

Palavras-chave: Lectina; antiedematogênico; migração.

Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005