|
||
| A. Ciências Exatas e da Terra - 4. Química - 4. Química de Produtos Naturais | ||
| ISOLAMENTO E PURIFICAÇÃO DE PRODUTOS NATURAIS POR CROMATOGRAFIA CONTRACORRENTE. | ||
| Alan Patrick Heringer 1 (alanpatrick@far.fiocruz.br), Rodrigo Rodrigues de Oliveira 1, Maria Auxiliadora Coelho Kaplan 2 e Maria Raquel Figueiredo 1 | ||
| (1. Depto. de Química de Produtos Naturais, Far-Manguinhos - FIOCRUZ-; 2. Núcleo de Pesquisa de Produtos Naturais - UFRJ) | ||
| INTRODUÇÃO:
A chave para o estudo químico das plantas está na seleção do método de isolamento e purificação de substâncias contidas nesses materiais botânicos. O avanço das técnicas cromatográficas na análise de extratos de plantas possibilitou o isolamento de diversas substâncias que são utilizadas pela indústria farmacêutica como princípio ativo de alguns medicamentos. Embora muitas técnicas cromatográficas utilizem suportes sólidos, nos últimos anos a necessidade de se obter bons rendimentos e rapidez na purificação de substâncias contidas nos extratos, estimulou a utilização da cromatografia contracorrente. A cromatografia contracorrente é uma cromatografia de partição sem suporte sólido, cuja fase estacionária é retida no aparelho pela ação da força centrífuga. A ausência desse suporte elimina certas inconveniências, como a interação da amostra com a matriz acarretando perda de material. Essa técnica cromatográfica é muito versátil por apresentar uma ampla faixa de separação (Kd = 0,2 a 3,5), além de ser utilizada na separação de substâncias de baixa a alta polaridade. Este trabalho tem como objetivo o isolamento de metabólitos secundários de baixa e alta polaridade das espécies Schinus terebinthifolius (aroeira) e Ocotea odorífera (canela-sassafrás) por cromatografia contracorrente. |
||
| METODOLOGIA:
Folhas de S. terebinthifolius e caules basais de O. odorifera foram coletados e extraídos, após secagem e moagem, por maceração dinâmica com metanol e hexano, respectivamente. O extrato metanólico de S. terebinthifolius foi submetido a partições sucessivas com hexano, clorofórmio, acetato de etila e butanol. A fração em acetato de etila por conter uma grande quantidade de substâncias fenólicas foi submetida à cromatografia contracorrente, utilizando o sistema de solvente CHCl3 : BuOH : MeOH : H2O (7:3:6:4). O extrato hexânico de O. odorifera rico em α-pironas, foi submetido à cromatografia contracorrente utilizando o sistema de solventes Hex: AcOEt: MeOH: H2O (1:2:2:1). Os sistemas de solventes empregados nas separações de fenólicos e de α-pironas por cromatografia contracorrente foram escolhidos pelo método “shake-flask”. Nesse método a amostra é simplesmente particionada entre as duas fases do sistema de solvente proposto em um tubo de ensaio. A concentração relativa das substâncias em cada fase (fase inferior e fase superior) é determinada pela cromatografia em camada fina (CCF). |
||
| RESULTADOS:
As frações resultantes da eluição cromatográfica em CCC, foram reunidas de acordo com o comportamento em CCD e analisadas por técnicas espectroscópicas de massas e RMN 1H e 13C, resultando na identificação da pentagaloilglucose, α,3,4,5-tetrahidroxitolueno e 3-O- β-D-glucopiranosil-(1→2)- β-D-glucopiranosídeo kaempferol para o extrato metanólico de S. terebinthifolius e 4-metoxiparacotoina, 4-metoxi-6-fenilcoumalina, 5,6-desidrometilsticina e desmetoxiyangoina para o extrato hexânico de O. odorífera. |
||
| CONCLUSÕES:
De acordo com os resultados obtidos, pode-se afirmar que a cromatografia contracorrente, a qual possibilita ampla combinação de solventes, foi uma ferramenta eficiente na separação de constituintes químicos de diferentes polaridades. |
||
| Instituição de fomento: Far-manguinhos/FIOCRUZ | ||
| Palavras-chave: α-pironas; Substâncias fenólicas; Cromatografia contracorrente. | ||
| Anais da 57ª Reunião Anual da SBPC - Fortaleza, CE - Julho/2005 |