C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 1. Biologia Molecular |
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Detecção e funcionalidade dos receptores nicotínicos de acetilcolina durante a diferenciação neuronal decélulas de feocromocitoma PC12 |
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Arthur Andrade Nery 1 |
Rodrigo Ribeiro Resende 1 |
Antônio Henrique Baccin Martins 2 |
Alexander Henning Ulrich 1 |
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(1. Universidade de São Paulo; 2. Universidade Federal de São Paulo) |
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INTRODUÇÃO: |
O presente trabalho tem como objetivo a caracterização da expressão e da atividade dos receptores nicotínicos de acetilcolina durante a maturação neuronal das células de feocromocitoma de rato PC12. |
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METODOLOGIA: |
As células PC12 são amplamente utilizadas como modelo da diferenciação in vitro, se diferenciando na presença de bFGF e dibutyril-cAMP. A atividade dos receptores nicotínicos de acetilcolina (nAChR) foi determinada a partir de medidas de cinética rápida em modalidade whole-cell e a expressão desses receptores foi avaliada com a utilização de PCR e quantificada por PCR real-time. |
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RESULTADOS: |
De acordo com esses dados, os níveis transcricionais dos mRNA codificantes para a subunidade alfa7 se mostra 2,2 vezes maiores no início da diferenciação, enquanto a expressão dos genes de alfa3, alfa5, beta2 e beta4 se mantém inalterados. A atividade de alfa7 foi determinada como a fração da corrente induzida por CCh o qual poderia ser inibida por 10nM de um antagonista específico do receptor alfa7 a essa concentração, o citrato de metillicaconitina (MLA). |
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CONCLUSÕES: |
Nossos resultados mostram que a atividade e a expressão das subunidades dos nAChR são moduladas durante o curso da diferenciação neuronal, com a subunidade alfa7 expressa no início da diferenciação. Como a subunidade alfa7 forma um canal altamente permeável a cálcio, essa subunidade e nAChR pode ser importante para a sinalização de cálcio durante o decorrer da diferenciação |
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Instituição de fomento: FAPESP e CNPq
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Trabalho de Iniciação Científica
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Palavras-chave: nAChR; PC12; Patch-Clamp. |
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Anais da 58ª Reunião Anual da SBPC - Florianópolis, SC - Julho/2006 |