As doenças infecto-parasitárias estão entre as principais causas de mortalidade e morbidez, particularmente em países de clima tropical, respondendo por cerca de 16 milhões de óbitos por ano, mas apresentam menor importância para a saúde pública das nações do Primeiro Mundo.

A doença de Chagas é responsável por afetar aproximadamente 16-18 milhões de pessoas e levando ao óbito cerca de 45.000 indivíduos por ano, principalmente nas Américas do Sul e Central. O fármaco empregado não é completamente eficiente, existindo muitos casos refratários e associados a efeitos colaterais importantes. Além disso a cura estéril geralmente não ocorre.

A inibição da síntese de poliaminas (PA) por parasitos foi testada em algumas infecções.

Ao contrário de outros protozoários, o T. cruzi não expressa a ODC (EC 4.1.1.17), sendo naturalmente auxiotrófico para esta diamina e dependendo de um sistema eficiente de transporte,  fato que reforça a importância do estudo destes compostos na doença de Chagas.

Nosso grupo observou que um análogo da putrescina, a 1,4-diamino-2-butanona (DAB), inibe a proliferação de T. foetus (Reis et al., 1999), mesmo durante o cultivo em meio complexo. Esta observação abriu uma erspectiva para o desenho de drogas para uso terapêutico em doenças parasitárias. Recentemente observamos que este análogo tem relevantes efeitos em T. cruzi  (Menezes et al., 2006).

Foram utilizados epimastigotas da cepa Y, mantidos em meio de cultura LIT suplementado com soro fetal bovino na proporção de 10% (v/v) e mantidos em estufas a 26 °C. A proliferação axênica dos parasitos foi quantificada por contagens em câmaras de Neubauer sob microscopia óptica de contraste de fase.

           Os parasitos foram cultivados por 72 horas após centrifugados em uma rotação de 2.500 rpm durante 5 minutos. Com o intuito de quantificar o estresse oxidativo, empregamos a técnica de TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico), que é avaliada através do aumento da peroxidação lipídica. Foi avaliada ainda a função mitocondrial pela técnica da redução do MTT [3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difeniltetrazoliobrometo]. As amostras foram também fixadas em uma solução contendo 2,5% de glutaraldeído, 4% de paraformaldeído em tampão cacodilato de sódio 0,1M, pH 7,2 e processadas para análise por microscopia eletrônica de transmissão.

Observamos que a DAB significativamente inibiu a proliferação dos parasitos in vitro.  A microscopia eletrônica de transmissão revelou extenso dano mitocondrial nos epimastigotas, o que foi comprovado pela técnica do de redução do MTT.  As mitocondrias constituem o principal sítio produtor de radicais oxidantes, gerando superóxido a uma taxa de aproximadamente 1-3% do oxigênio que ingressa na organela.

Assim sendo, decidimos avaliar o estresse utilizamos a técnica de TBARS.  Observamos que enquanto 5mM de DAB aumentam a peroxidação lipídica, incubações com 10mM deste análogo resultaram em reduzida peroxidação, presumivelmente porque a organela foi completamente destruída.