60ª Reunião Anual da SBPC

INTRODUÇÃO:

Fungos são utilizados industrialmente, como Penicillium na obtenção da penicilina e Aspergillius niger na obtenção deprogesterona e ácido cítrico, de exopolissacarídeos com potencial terapêutico, como integradores e aromatizadores de alimentos como sopas e cremes, na maturação de queijos do tipo roquefort e camembert. Leveduras são utilizadas como agentes de fermentação alcoólica na fabricação de vinhos, cervejas e fermentos; desenvolvem-se em líquidos com alta concentração de açúcar e são responsáveis pela formação de filme na superfície de líquidos de origem vegetal. Podem ser utilizadas na síntese de produtos graxos; e também são capazes de produzir amilase. Leveduras fermentadoras são as que mais interesse têm em microbiologia industrial, utilizadas emmuitas transformações em alimentos, para produção de medicamentos e de combustíveis. Como exemplos, pode-se citar: S. cerevisae, S. calrsbergensis, S. fragilis, S. lactis, S. roufii, S. mellis, S. baillie, Torulopsis osmofílica, Candida sp, Rhodutorula. O presente trabalho insere-se neste contexto, na medida em que avalia o potencial enzimático de espécies de leveduras encontradas em amostras comerciais de fermentos industriais.

METODOLOGIA:

Amostras de fermento comercial ‘in natura’, foram divididas em alíquotas de 1g, e homogeneizadas em caldo BHI ou caldo de Extrato de Malte. Incubação de 48 horas a 30 ou 35ºC, foi observada. Após enriquecimento, amostras foram semeadas em placas contendo meios Agar Batata Dextrose (PDA) e Agar Sabouraud Dextrose (SDA), incubadas a 30 ou 35º, por 72 horas, para isolamento de leveduras. Cada isolado foi corado por Gram, para detecção de leveduras; se positivo para levedura, o isolado foi semeado em tubo de Sabouraud-Dextrose Agar, e incubado a 30 ou 35ºC por 48 horas. Todos os isolados purificados foram identificados por técnicas morfológicas e metabólicas convencionais, como técnicas auxográficas (assimilação) e zimogramas ( fermentação). Cada levedura isolada foi ensaiada quanto a atividades enzimáticas específicas, envolvendo: atividade proteolítica inespecífica, gelatina, gelose, tripsina, lignina, celulose, maltodextrina, glucanase, xilanase, galactanase, caseína e fermentação alcoólica. Para ensaio, a um meio-base mínimo foi incorporado o substrato para a atividade enzimática que se desejar estudar. A incubação foi realizada em temperaturas diferentes: 25, 30, 37, 44 e 56ºC, por 24-48 horas.

RESULTADOS:

Foram isoladas cepas de Saccharomyces, S. ovale, S. utilis e S. cerevisiae, e de espécies de Candida, Schizosaccharomyces, Hansenula, e leveduras-pretas (“black-yeasts”). Os isolados apresentaram atividade proteolítica, amilase e hialuridase, porém atividade quitinase só ocorreu para um isolado de S. utilis, atividade celulase e ligninase apenas para 3 cepas de S. ovale, 3 de S. cerevisiae e 1 de Hansenula. Cepas isoladas testadas de Saccharomyces apresentaram atividade proteolítica entre as temperaturas de 30 e 44ºC, capacidade fermentativa em todas as temperaturas testadas, porém atividades celulase e ligninase apenas em temperaturas de 44º e 56ºC. Leveduras pretas isoladas apresentaram apenas atividade proteolítica e celulolítica, de baixa intensidade. As cepas de Candida, Schizosaccharomyces e Hansenula tiveram um padrão de atividade mais variável, não permitindo descrever-se um padrão.

CONCLUSÕES:

Dos isolados, 70% são do gênero Saccharomyces, S. ovale, S. utilis e S. cerevisiae. Os restantes são espécies de Candida, Schizosaccharomyces, Hansenula, e isolados de leveduras-pretas. Todos os isolados apresentaram atividade enzimática de interesse, porém variável, e como esperado pela observação de resultados de outros autores, as cepas do gênero Saccharomyces, foram mais eficientes nesse quesito e na atividade fermentadora. Apesar disso, atividades enzimáticas importantes parra a indústria de alimentos, de papel, têxtil e farmacêutica foram observadas em praticamente todos os isolados. Como esses isolados foram obtidos em um tipo de material que normalmente é descartado pelas industrias, sugere-se a necessidade de elaboração de protocolos de reciclagem dos resíduos de fermentação. Desta forma, estes resíduos poderiam tornar-se em fonte alternativa bastante barata para obtenção de novas cepas leveduriformes com perfil metabólico atraente.

Instituição de fomento: Centro Universitário Barão de Mauá – Programa de Iniciação Científica (PIC)

Trabalho de Iniciação Científica

Palavras-chave: enzimas, leveduras, fermentação

E-mail para contato: karina_zoccal4@hotmail.com