60ª Reunião Anual da SBPC

INTRODUÇÃO:

Os basidiomicetos (cogumelos) são caracterizados pela formação do basidioma e têm grande importância ambiental, industrial e biotecnológica. Contribuem para decomposição da matéria orgânica formando o húmus. Decompõem principalmente madeira dura, degradando a lignina, um polímero fenilpropanóide recalcitrante da parede celular vegetal. Enzimas oxidativas não-específicas (ligninases) são responsáveis pela degradação desse polímero. Vários xenobióticos possuem composição química semelhante aos derivados da lignina podendo ser oxidados pelas ligninases. Assim, o uso de ligninases é interessante na bioremediação e mostram-se economicamente viáveis e mais eficientes que os processos físico-químicos. Os herbicidas organoclorados atrazina e diurom, de intenso uso na cultura de cana de açúcar no Brasil, são fatores de contaminação dos solos e águas, em razão da sua recalcitrância e elevada mobilidade no solo. Por outro lado, efluentes industriais com alta salinidade são gerados em setores, como o têxtil, e pouco se sabe sobre a influência da osmolaridade na capacidade degradativa da microbiota nativa. Desse modo, o objetivo desse estudo é a prospecção de basidiomicetos com halotolerância para bioremediação de ambientes com alta pressão osmótica e capacidade de degradar hebicidas.

METODOLOGIA:

Esse estudo foi realizado com o basidiomiceto Hexagonia hirta MCA131 da coleção do Laboratório de Bioquímica e Microbiologia Aplicada do IBILCE/UNESP. Essa linhagem foi isolada a partir de troncos de árvores em decomposição na mata remanescente da Estação Ecológica do Noroeste Paulista, nos municípios de São José do Rio Preto e Mirassol/SP. O fungo foi inoculado em placas de Petri com meio BDA e cloreto de sódio (NaCl) nas concentrações de 0 a 5%. Um disco de micélio com 1 cm de diâmetro foi inoculado no centro de cada placa e incubadas em estufa a 28º C por 15 dias. O crescimento micelial foi medido diariamente, com auxílio de uma régua. O mesmo experimento foi realizado com meio BDA contendo o herbicida Diurom nas concentrações de 12,80 g.l^-1 e 20,48 g.l^-1, ou atrazina nas concentrações de 6,25 g.l^-1 e 10,0 g.l^-1 em substituição ao sal. Em seguida, foi realizada a fermentação submersa do fungo a 40 rpm, utilizando-se o meio nutritivo de Zouari-Mechichi (2006, com modificações), com 3% de NaCl a 28º C. Esse experimento teve duração de 14 dias e as fermentações foram retiradas a cada 48 horas e filtradas à vácuo com papel de filtro. Esse papel foi dessecado em estufa para determinação da biomassa por peso seco.

RESULTADOS:

O experimento com BDA e NaCl demonstrou que H. hirta tem seu crescimento totalmente inibido em meios cuja concentração salina é superior a 3%, registrando crescimento de 0,96 cm/dia, 0,74 cm.dia^-1, 0,54 cm.dia^-1 e 0,24cm.dia^-1, respectivamente, para meios com 0%, 1%, 2% e 3% de NaCl. Os índices de inibição em relação ao meio sem sal foram de 22,88% em meio com 1% de sal, 43,79%, com 2% e 75,16%, com 3%. No ensaio com o diurom, o crescimento micelial foi de 2,72 cm.dia^-1 no controle, 0,43 cm.dia^-1 em 12,80 g.l^-1 de herbicida, com inibição de 84,24% e 0,32 cm.dia^-1 em 20,48 g.l^-1, com inibição de 88,1% do crescimento em relação ao controle. Em meio contendo atrazina, nas concentrações de 6,25g.l^-1 e 10,0g.l^-1, a inibição do crescimento em relação ao controle foi de 58,5% e 61 %, respectivamente. Os resultados desses experimentos mostram que esse basidiomiceto, conseguem se desenvolver relativamente bem em condições de grande estresse osmótico e químico. No ensaio de fermentação submersa, o crescimento do controle foi de 0,55 g.l^-1.dia^-1 e em meio com 3% de sal, 0,4 g.l^-1.dia^-1, com inibição de 26,55%. Nessas condições, a inibição foi menor do que em meio sólido, mesmo comparando-as com os meios menos concentrados de sal e Diurom.

CONCLUSÕES:

Nesse estudo, Hexagonia hirta mostrou-se capaz de se desenvolver em meios onde o estresse osmótico e químico foi grande. Esse resultado indica que esse basidiomiceto tem grande potencial de adaptação a essas condições. Outro resultado interessante apontado nesse trabalho é a influência que as condições do meio podem exercer sobre o crescimento micelial indicando que a fermentação submersa possa ser um sistema mais eficiente de cultivo, atestando o potencial do microrganismo para o tratamento de efluentes líquidos. A utilização de herbicidas como fonte de carbono pode ser a razão da adaptação desse fungo a meio com alta concentração desses compostos, mas o estudo do grau de degradação dos herbicidas é necessário para dar maior respaldo a essa conclusão. Da mesma forma deverão ser feitas análises enzimáticas para verificação dos efeitos desses estresses sobre o sistema enzimático do fungo.

Instituição de fomento: FAPESP

Palavras-chave: Basidiomiceto, Halotolerância, Herbicidas

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