60ª Reunião Anual da SBPC

INTRODUÇÃO:

A epidemia da infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (Human Immunodeficiency Virus – HIV) é um fenômeno global, dinâmico e instável, que se traduz em um mosaico de subepidemias regionais da síndrome da imunodeficiência adquirida. No Brasil há atualmente 13,1 mil pessoas portadores do HIV-1 sendo 58,8% do sexo masculino e 41,2% do sexo feminino. Indivíduos HIV-positivos apresentam resposta imunitária deficiente, propiciando o aparecimento de doenças oportunistas e neoplasias malignas. Dentre estas podemos destacar as doenças associadas ao herpesvírus associado ao sarcoma de Kaposi (Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus - KSHV), ou herpesvírus humano tipo 8 (Human Herpesvirus type 8-HHV-8). O objetivo deste estudo foi avaliar a presença do KSHV/HHV-8 nas amostras de sangue periférico e analisar a distribuição dos genótipos virais, bem como as possíveis correlações com os dados gerais, clínicos e laboratoriais dos pacientes portadores do HIV.

METODOLOGIA:

A partir de amostras de sangue periférico obtidas de 100 pacientes portadores do HIV-1 atendidos no Hospital-dia de HIV/Aids da FMB foi extraído DNA para a detecção do genoma do KSHV/HHV-8 por PCR convencional. A extração do DNA foi realizada a partir de alíquota de 200µL da camada leucocitária com o sistema QIAamp DNA Blood Midi Kit® (Qiagen, Valencia, CA), conforme instruções fornecidas pelo fabricante. Inicialmente, alíquota do DNA extraído foi submetida à PCR convencional para a amplificação de segmentos de 130pb da região promotora do gene da IL-10 na posição -1082. A pesquisa de infecção pelo KSHV/HHV-8 foi realizada pela amplificação de segmento da ORF-K1 viral utilizando 4µL do DNA dos pacientes. A genotipagem do vírus foi efetuada pela análise de PCR-RFLP do amplicon da ORF-K1 amplificada por meio de nested-PCR. Para cada reação de nested-PCR foi utilizada uma alíquota do produto da respectiva primeira reação de PCR. Após a análise do resultado da amplificação em gel de agarose 2% corado com brometo de etídio, o produto de 247pb da nested-PCR para ORF-K1 foi digerido utilizando 5 enzimas de restrição (Taq I, Nsi I, Hinf I, Hae III e Mse I). O resultado da RFLP foi interpretado após eletroforese em gel de agarose utilizando marcadores de peso molecular de 50pb.

RESULTADOS:

Dos 100 pacientes do estudo, 41% eram do sexo feminino e 59% do sexo masculino. Dos 59 homens, 72,9% declararam-se heterossexuais, 15,3% bissexuais e 11,9% revelaram ter relacionamento sexual com outros homens (HSH). Entre as 41 mulheres, 97,6% declararam-se heterossexuais e 2,4% bissexuais. A relação heterossexual foi a via presumida de contágio mais freqüente, correspondendo a 80,0% da casuística. Em relação à viremia do HIV-1 no período de coleta da amostra de sangue periférico, 61,0% dos pacientes apresentava menos de 50 cópias virais/mm³ de sangue, 17,0% apresentavam 50-1.000 cópias, 11,0% apresentavam 1.000-10.000 cópias, 8,0% apresentavam 10.000-100.000 cópias e 3,0% apresentavam carga viral superior a 100.000 cópias HIV-1/mm³ sangue. Em relação aos níveis de linfócitos T CD₄⁺ e T CD₈⁺ , os pacientes apresentaram média de 493,1células/mm³ e 1.034,20 células/mm³, respectivamente. Houve correlação linear negativa entre a contagem de linfócitos T CD₄⁺ e a viremia, bem como correlação linear positiva entre os títulos de linfócitos T CD₄⁺ e T CD₈⁺ . Das 100 amostras de sangue submetidas à detecção do KSHV/HHV-8 pela PCR, apenas uma (1%) foi consistentemente positiva. Após a análise por PCR-RFLP, essa amostra exibia padrão de digestão compatível com o genótipo C do vírus.

CONCLUSÕES:

Na presente casuística, pacientes portadores do HIV-1 do sexo feminino eram significativamente mais jovens que os pacientes do sexo masculino. Notadamente entre as mulheres, a principal via presumida de contágio referida foi a relação heterossexual. Esses dados estão em consonância com a situação epidemiológica da infecção pelo HIV-1 no país. Pacientes com maiores níveis circulantes do HIV-1 apresentaram menores títulos de linfócitos T CD₄⁺ ; por outro lado, os níveis de linfócitos T CD₄⁺ e T CD₈⁺ estiveram relacionados de maneira diretamente proporcional. Esses parâmetros refletem a patogênese da infecção pelo HIV-1 e seu impacto na resposta imunitária dos indivíduos portadores do vírus. Foi encontrada baixa taxa de infecção pelo KSHV/HHV-8 nos pacientes portadores do HIV-1, resultado potencialmente relacionado ao baixo número de cópias do vírus em células do sangue periférico, aos efeitos diretos e indiretos do tratamento anti-retroviral ou mesmo uma baixa freqüência de exposição dos indivíduos avaliados ao vírus. Em virtude do pequeno número de pacientes KSHV/HHV-8-positivos na casuística, não foi possível avaliar as repercussões da infecção por esse vírus nos pacientes portadores do HIV-1.

Instituição de fomento: FAPESP - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo. / AP: 2006/03643-6 / IC: 2007/00009-7

Trabalho de Iniciação Científica

Palavras-chave: HIV-1, AIDS, KSHV/HHV-8

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