C. Ciências Biológicas - 8. Genética - 3. Genética Humana e Médica
DESCRIÇÃO DE UM CASO DE DISGENESIA GONADAL XY CAUSADA PELA MUTAÇÃO NOVA E89K NO GENE SRY
Renan Darin Bernardi1
José Luiz Rosenberis Cunha Junior1
Fernanda Caroline Soardi1
Luiz Eduardo Chimello de Oliveira1
Gil Guerra Junior2
Maricilda Palandi de Mello1, 3
1. Departamento de Genética Humana - CBMEG - Unicamp
2. GIEDDS - FCM - Unicamp
3. Orientadora
INTRODUÇÃO:O gene SRY (Sex Determining Regem in chromosome Y), localizado no braço curto do cromossomo Y, codifica uma proteína de 204 aminoácidos dos quais 79 constituem um domínio denominado HMG-box que confere a esta proteína a capacidade de interagir com o DNA. Este domínio é comum entre proteínas reguladoras de expressão. A expressão normal do gene SRY durante a vida intra-uterina induz as gônadas indiferenciadas a transformarem-se em testículos a partir da diferenciação das células de Sertoli primordiais em células adultas, constituindo o primeiro passo para a diferenciação sexual masculina nos embriões de mamíferos. Assim, mutações no gene SRY podem causar falha no desenvolvimento testicular levando à reversão sexual completa ou parcial. Considerando os casos de Disgenesia Gonadal XY em geral, as mutações no gene SRY são responsáveis por cerca 20% dos casos. Neste projeto estudou-se o gene SRY de uma paciente previamente diagnosticada com disgenesia gonadal. Foi encontrada a alteração E89K provocada pela troca G>A na posição nucleotídica 265 a partir do ATG. A alteração está localizada dentro do domínio HMG-box da proteína e ainda não foi descrita na literatura. Nos genes SRY dos familiares não foi encontrada nenhuma mutação, concluindo-se que se trata de uma mutação “de novo”.METODOLOGIA:A paciente e os familiares foram encaminhados pelo Grupo Interdisciplinar de Estudos da Determinação e Diferenciação do Sexo do Hospital das Clínicas (GIEDDS), Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), Campinas, SP, Brasil. A extração do DNA genômico foi realizada a partir de sangue total periférico através do método fenol/clorofórmio. O gene SRY, que não contém íntrons, foi amplificado pela Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) a partir do DNA genômico com primers específicos para as regiões flanqueadoras do gene. Os produtos de PCR foram seqüenciados em duas reações separadas, utilizando-se os primers sense e antisense. O seqüenciador automático ABI PRISM 310 foi utilizado para a leitura. As seqüências obtidas foram analisadas e comparadas com a seqüência normal do gene utilizando os softwares Gene Runner e Chromas.RESULTADOS:No gene SRY da paciente foi encontrada a alteração E89K provocada pela troca G>A na posição nucleotídica 265 a partir do ATG. Nos genes SRY do pai e do irmão da paciente não foi encontrada nenhuma mutação.CONCLUSÕES:A alteração E89K provocada pela troca G>A na posição nucleotídica 265 a partir do ATG é uma mutação “de novo”, não sendo herdada dos parentais. Esta alteração está localizada dentro do domínio HMG-box da proteína e ainda não foi descrita na literatura. Diante destes resultados, pretende-se fazer o estudo molecular do efeito biológico desta variante e suas conseqüências na função de ligação da proteína SRY mutante ao DNA alvo.
Instituição de fomento: Fapesp e CNPq
Palavras-chave: SRY, Disgenesia gonadal, Mutações
E-mail para contato: renandarin@gmail.com
|
|