60ª Reunião Anual da SBPC

INTRODUÇÃO:

A Tricomonose Genital Bovina (TGB) é uma doença sexualmente transmissível e infecciosa causada pelo protozoário flagelado Tritrichomonas foetus (T. foetus) e está associada à redução da produtividade dos rebanhos acometidos, com determinação de abortamentos, vaginite, endometrite, piometra, infertilidade, morte embrionária inicial, maceração fetal, tendo como conseqüência a redução na produção de carne e leite (LÓPEZ et al., 2000; RAE & CREWS, 2006). Não há dados sobre a transmissão através da TGB pela inseminação artificial (IA), mas o sêmen sem controle sanitário é considerado como fator de risco (CATENA & CABODEVILA, 1999). Então, se a transmissão por IA for possível estará difundindo a doença e expandindo o número de rebanhos infectados, mesmo com a utilização da biotécnica de transferência de embriões que segundo CARVALHO et al. (2007) o risco de se encontrar T. foetus embriões coletados de doadoras infectadas é baixo, no entanto, o próprio autor recomenda o desenvolvimento de mais estudos para termos uma idéia mais precisa dos riscos de transmissão. O objetivo deste trabalho foi de avaliar a presença T. foetus antes o congelamento e pós-congelamento do sêmen bovino.

METODOLOGIA:

O trabalho de manutenção e criopreservação das culturas de T. foetus foram conduzidos no Laboratório de Patologia da Reprodução do Projeto Sanidade Animal, do convênio Embrapa/UFRRJ. Com a cessão de amostras do LABACVET/UFRGS, foi utilizada no experimento 4/6, isolada de feto abortado. Foram utilizados touros mestiços, dos quais procedeu-se a coleta de sêmen pelo método da vagina artificial, sendo avaliados volume, aspecto, turbilhonamento, motilidade, vigor e concentração do sêmen a fresco. Este foi diluído a 30x10⁶ sptz/palheta de 0,5 mL e acrescido precipitados de T. foetus, em fase log. Utilizou-se como crioprotetor o glicerol a 6,4% e o diluidor tris-gema. O congelamento foi realizado segundo Lorton et al. (1988) em duas etapas, envasados e permaneceram sobre o vapor de nitrogênio durante 20’ para que haja a diminuição da temperatura até menos 120 °C. Então as palhetas serão removidas e colocadas dentro do botijão de nitrogênio a menos 196°C. A cada congelamento de sêmen e protozoário foram utilizadas vinte palhetas.

RESULTADOS:

Quanto a avaliação microscópica do sêmen, estavam dentro dos padrões de congelamento e a concentração espermática foi em média de 845 x 10⁶ espermatozóides/mL. Após descongelamento da palheta de 0,5 mL em banho maria a 37°C por 30’’, procedeu-se a avaliação microscópica de motilidade e vigor espermático e a presença de protozoário, onde o sêmen encontrava-se apto e a morfologia do protozoário em todas as palhetas. Então, inoculou-se o restante do conteúdo da palheta em Diamond a 35°C ± 2°C e avaliou-se a cada 24 horas durante dez dias. A cada congelamento, uma palheta era descongelada para avaliação espermática e do protozoário como citado acima. As outras dezenove palhetas foram descongeladas em até 20 dias após congelamento. O material foi adicionado ao meio de Diamond, com intuito de avaliar a motilidade do protozoário e houve a morte do sêmen por não ser um meio próprio para a sua sobrevivência. O protozoário estava visível ao exame microscópico pós-descongelamento, mas não houve crescimento no meio de cultivo, no período de dez dias, com observações microscópicas a cada 24 horas. Após estas avaliações não pode ser descartado o risco via sêmen, sem controle sanitário, para a transmissão da TGB, como afirmam Catena & Cabodevila (1999) e Rae & Crews (2006).

CONCLUSÕES:

Quanto à viabilidade da manutenção de T.foetus em sêmen criopreservado experimentalmente infectado necessita de mais estudos visando a biossegurança, quanto ao uso de sêmen nas biotécnicas reprodutivas.

Instituição de fomento: CNPq/PIBIC

Trabalho de Iniciação Científica

Palavras-chave: criopreservação, tricomonose, bovino

E-mail para contato: jesus@ufrrj.br