61ª Reunião Anual da SBPC
C. Ciências Biológicas - 8. Genética - 3. Genética Humana e Médica
ESTUDO DE FREQÜÊNCIA DO LÓCUS -308 G/A, -244 G/A E -238 G/A DO GENE TNFα
Daniel Delani 1
Almeida Andrade Casseb 1
Vera Engracia Gama de Oliveira 1
1. Instituto de Pesquisas em Patologias Tropicais
INTRODUÇÃO:
O fator de necrose tumoral é uma citocina envolvida na sepse, faz parte de uma superfamília de proteínas que induzem necrose das células tumorais, e caracteriza-se como uma das moléculas mais importantes na promoção da resposta inflamatória. Sua estrutura desempenha uma série de ações em vários sistemas orgânicos, sendo produzido, sobretudo por macrófagos. A indução da resposta imune depende da expressão e co-estimulação de moléculas e citocinas dos antígenos presentes na célula. A população de Rondônia é caracterizada por uma grande variabilidade étnica, além de estar localizada em um ponto da Amazônia brasileira com vários tipos de patologias tropicais predominantes. Essa exposição a endemias como a malária podem ter exercido uma pressão gênica favorecendo o aparecimento de polimorfismos que possam estar associados diretamente com essas patologias. Assim, espera-se analisar 03 mutações (-308, -244 e -238) localizadas no gene TNFα, em diferentes amostras populacionais do estado de Rondônia calculando-se as freqüências gênicas e genotípicas destas amostras.
METODOLOGIA:
Foram selecionadas aleatoriamente 1000 amostras de 14 populações do estado de Rondônia e de mais duas unidades hospitalares do município de Porto Velho – RO, onde foram coletados dados antropogenético e foi realizada a anamnese. Foram coletados 10ml de sangue total, dentro dos padrões do CONEP sob o número de aprovação (13356/REGISTRO NO CEP 051/6). A extração do DNA foi realizada através do método Brazol e para analise das amostras estão sendo utilizadas às técnicas de PCR (reação em cadeia da polimerase), RFLP (análise do polimorfismo do fragmento de restrição), seguidos de eletroforese em géis de agarose e poliacrilamida. Para as análises estatísticas dos dados foi utilizado o Programa GENEPOP, (Version 3,4, 2003). Estimando freqüências gênicas e genotípicas. Os dados estão armazenados em banco de dados SPSS 15.00.
RESULTADOS:

A freqüência do alelo GA para o lócus -308 foi de 0,0598 para o alelo GA (heterozigoto), em um total de 167 indivíduos estudados, (0,08 em Engenho Velho, 0,063 em Candelária, 0,058 em Cacoal/Jarú e de 0,103 em Bate Estaca). Na distribuição alélica foi observado uma freqüência de 0,0299 para o alelo A (com a mutação), e 0.9701 para o alelo G (selvagem). Nos lócus -238 e -244 o alelo selvagem foi predominante, ou seja, a população em estudo foi monomórfica em 53 indivíduos analisados, confirmando a prerrogativa de que as populações estudadas estão em equilíbrio Hardy-Weinberg.

CONCLUSÃO:

Estas análises ainda não permitem realizar associações entre haplótipos do TNF e as manifestações graves de infecção, devido o baixo número amostral analisado neste trabalho até o momento. Análises estão em andamento a fim de estabelecer um perfil característico do gene TNFα na população em estudo, e assim concluir os testes moleculares destas amostras.

Palavras-chave: TNFα, Malaria, Polimorfismos Genéticos.