62ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 5. Química de Macromoléculas

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTICOAGULANTE E EFEITO HEMORRÁGICO DE HEPARINÓIDES ISOLADOS DOS CARANGUEJOS Ucides cordatus E Chaceon fenneri

Raquel Helen Brito de Araújo 1 Fernanda Marques de Azevedo 1 Dayse Santos Arimatéia 1 Airton Araújo de Souza Júnior 1 Rayani Umbelino Reis 1 Giulianna Paiva Viana de Andrade Souza 1

1. Depto. de Bioquímica, Centro de Biociências - UFRN

INTRODUÇÃO:

A heparina faz parte de um grupo de polissacarídeos denominados glicosaminoglicanos que apresentam amplo espectro de utilização farmacológica devido a sua grande variabilidade estrutural. A heparina é um agente farmacêutico de origem animal amplamente utilizado na Medicina, devido ao seu potente efeito anticoagulante. Atualmente é empregada na prevenção e profilaxia de trombose venosa profunda, contribuindo para a diminuição de mortalidade por tromboembolismo pulmonar. Entretanto, a sua aplicabilidade clínica pode ser comprometida pelo elevado risco hemorrágico. Dessa forma, a busca de fontes naturais desse composto com baixo risco hemorrágico e possível aplicabilidade terapêutica/biotecnológica tem sido almejada por vários grupos de pesquisa em diversas partes do mundo. A ocorrência de compostos naturais tipo heparina (heparinóides) em invertebrados com características estruturais intermediárias à heparina e heparam sulfato e com baixa atividade anticoagulante torna esses compostos viáveis como potenciais agentes terapêuticos, com baixo risco hemorrágico. O presente trabalho avalia o efeito de heparinóides naturalmente obtidos dos caranguejos Ucides cordatus e Chaceon fenneri na coagulação sanguínea, assim como seus efeitos hemorrágicos.

METODOLOGIA:

Os espécimes dos caranguejos Ucides cordatus e Chaceon fenneri foram fragmentados e submetidos à proteólise, cromatografia de troca iônica e fracionamento com volumes crescente de acetona. As frações obtidas foram submetidas à eletroforese em gel de agarose nos tampões 1,3 diaminopropano acetato 0,05Molar, pH 9,0 (PDA) e Bário/PDA. A atividade antihemostática foi realizada utilizando o método de escarificação da cauda do rato, para que fosse observado o efeito hemorrágico residual da heparina e dos compostos extraídos dos caranguejos. A atividade anticoagulante in vitro foi determinada pelo ensaio do tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT), utilizando-se plasma humano normal citratado de acordo com as especificações do fabricante Labtest. A atividade anticoagulante e a atividade antihemostática, dos compostos extraídos dos caranguejos, foram determinadas em relação à heparina de mamífero (padrão) ensaiada nas mesmas condições.

RESULTADOS:

Os heparinóides obtidos dos caranguejos U. cordatus e C. fenneri mostraram migração eletroforética semelhante à heparina/heparam sulfato no sistema de tampão PDA. No sistema Bário/PDA, esses compostos apresentaram principalmente a fração de migração rápida da heparina. No ensaio anticoagulante, os compostos isolados dos caranguejos se apresentaram como agentes anticoagulantes in vitro menos potentes do que a heparina padrão. Essa atividade reduzida pode estar relacionada ao menor grau de sulfatação dos compostos, sugerindo uma menor quantidade de dissacarídeos trissulfatados quando comparados a heparina de mamífero. Também, o heparinóide isolado do caranguejo U. cordatus apresentou uma atividade anticoagulante maior do que o heparinóide do caranguejo C. fenneri. Os heparinóides isolados dos caranguejos apresentaram menor efeito antihemostático quando comparado ao efeito da heparina de mamífero, refletindo em um menor risco hemorrágico. Esse baixo risco pode estar relacionado a estrutura menor sulfatada desses compostos, quando comparada com a heparina, uma vez que estudos realizados com dissacarídeos derivados de heparina, heparam sulfato e condroitim sulfato mostraram que um sulfato na posição C-6 do resíduo de glucosamina, é a estrutura mínima para a atividade antihemostática.

CONCLUSÃO:

Os heparinóides dos caranguejos Ucides cordatus e Chaceon fenneri apresentaram um perfil eletroforético com banda de migração entre a fração de migração rápida da heparina e do heparam sulfato. Os heparinóides obtidos dos caranguejos Ucides cordatus e Chaceon fenneri apresentaram baixa atividade anticoagulante in vitro usando aPTT quando comparada a heparina de mamífero (padrão), a qual é comercial. Porém, pode-se observar que o heparinóide do U. cordatus apresentou desempenho melhor do que o heparinóide do C. fenneri. Os heparinóides obtidos dos caranguejos Ucides cordatus e Chaceon fenneri não mostraram efeito hemorrágico residual utilizando o modelo de escarificação da cauda de rato, o que torna tais compostos agentes terapêuticos em potencial.

Instituição de Fomento: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico -CNPq

Palavras-chave: Heparinóides, Caranguejos, Antihemostático.