62ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 10. Microbiologia - 2. Microbiologia Aplicada

BACTÉRIAS METILOTRÓFICAS FACULTATIVAS DE COLORAÇÃO ROSA ASSOCIADAS A PLANTAS DE CANA-DE-AÇÚCAR: ISOLAMENTO E FIXAÇÃO BIOLÓGICA DE NITROGÊNIO

Pedro Avelino Maia de Andrade 1 Diogo Paes da Costa 1 Luana Lira Cadete 1 Andresa Priscila de Souza Ramos 2 Fernando José Freire 2 Júlia Kuklinsky-Sobral 1

1. Unidade Acadêmica de Garanhuns, Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE) 2. Depto. Agronomia, Universidade Federal Rural de Pernambuco

INTRODUÇÃO:

O grupo de bactérias metilotróficas facultativas pigmentadas de rosa (Pink-Pigmented Facultatively Methylotrophic Bacteria - PPFMs) se caracterizam pela capacidade de crescer utilizando compostos com apenas um carbono como o metanol ou formaldeído, como única fonte de energia. Apresentam distribuição em diferentes nichos, mas quando em associação com os vegetais pode contribuir com a indução de resistência sistêmica, aceleração da germinação e o crescimento vegetal, além de produzir sideróforos, fixar nitrogênio atmosférico, e outros (Sy et al., 2001; Madhaiyan et al., 2005). Neste contexto, a cana de açúcar é uma cultura de destaque no Brasil obtendo números de produção e produtividade relevantes (IBGE - 2010). Atualmente, a busca por mecanismos que favoreçam o desenvolvimento da agricultura sustentável faz com que avaliação de fatores ambientais potencialmente favoráveis sejam primordialmente valorizados. Portanto, o presente trabalho teve como objetivo o isolamento de bactérias metilotróficas facultativas de cor rosa associadas a plantas de cana-de-açúcar e a seleção de bactérias com capacidade de fixar nitrogênio in vitro.

METODOLOGIA:

Foram utilizadas plantas das variedades RB 867515 e RB 92579 de cana-de-açúcar (Saccharum spp.) cultivadas em Pernambuco. Para o isolamento de bactérias do rizoplano foram utilizados cerca de 1g de raiz, que foram colocados em frascos contendo 50ml de tampão PBS. Estes frascos foram mantidos sob agitação (90rpm) a 28oC por 1h. Em seguida, diluições apropriadas em tampão PBS foram inoculadas meio MMS (Metanol e Sais minerais) (Holland et al. (2000). As bactérias endofíticas foram isoladas por meio de desinfecção superficial das amostras de raízes, segundo Mendes et al. (2007). Os tecidos foram triturados em tampão PBS e, em seguida, diluições apropriadas foram inoculadas meio MMS. As placas foram incubadas a 28oC e avaliadas com 2, 8 e 15 dias de crescimento. A população bacteriana por grama de tecido vegetal fresco (UFC/g TVF) foi estimada pela contagem de colônias cultivadas em meio MMS. A seleção de bactérias fixadoras de nitrogênio foi realizada por meio da inoculação das bactérias em meio semi-sólido livre de nitrogênio, NFb (Dobereiner et al., 1995), incubadas a 28°C por 10 dias. Os experimentos foram realizados em triplicatas e o resultado positivo foi caracterizado pela presença de um halo horizontal de crescimento no meio de cultura

RESULTADOS:

A presença de bactérias metilotróficas facultativas pigmentadas de rosa (PPFM) foi observada nas duas variedades de cana-de-açúcar avaliadas. A densidade populacional total de bactérias metilotróficas facultativas endofíticas de raiz e do rizoplano de plantas de cana-de-açúcar variou em torno de 102 a 104 UFC/g de TVF, observando-se que houve maior colonização deste grupo bacteriano no rizoplano das plantas analisadas do que no interior do tecido vegetal, para as duas variedades de cana. Neste contexto, a colonização e distribuição de bactérias associadas às plantas podem ser influenciadas por variações sazonais, tipos de tecido vegetal e tipo de solo (Rosenblueth & Martinez-Romero, 2006). Foram selecionadas 71 linhagens bacterianas que apresentaram pigmentação rosa e avaliadas quanto a capacidade de fixar nitrogênio in vitro. Foi observado que 73% das linhagens foram positivas. Considerando-se o nicho do isolamento e a variedade das bactérias fixadoras de nitrogênio, constatou-se que 52% foram isoladas da raiz e 48% foram isoladas do rizoplano. Em relação a variedade da planta; observou-se que 52% dos isolados foram da variedade RB 867515 e 48% da variedade RB 92579.

CONCLUSÃO:

Os resultados observados mostram a íntima relação de bactérias metilotróficas facultativas com a cana-de-açúcar, podendo trazer benefícios para a planta hospedeira, como a fixação biológica de nitrogênio. Portanto, as linhagens obtidas no presente trabalho estão sob maiores análises.

Instituição de Fomento: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq; Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco - FACEPE

Palavras-chave: Interação bactéria-planta, Fixação de nitrogênio, Bactérias metilotróficas.