62ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 5. Química de Macromoléculas

EFEITO ANTIPROLIFERATIVO DE FUCANAS EXTRAÍDAS DA ALGA MARROM Spatoglossum schröederi FRENTE À CÉLULAS DE LINHAGEM TUMORAL 786-0

Leonardo Thiago Duarte Barreto Nobre 1 Ruth Medeiros de Oliveira 1 Jailma de Almeida Lima 1 Arthur Antunes Jacome Vidal 1 Edda Lisboa Leite 1 Hugo Alexandre de Oliveira Rocha 1

1. Depto. de Bioquímica, Universidade Federal do Rio Grande do Norte/UFRN

INTRODUÇÃO:

As algas marinhas são conhecidas fontes de polissacarídeos sulfatados, macromoléculas amplamente estudadas devido as suas variadas propriedades. Nas algas marrons os principais tipos de polissacarídeos sulfatados encontrados são as fucanas e fucoidans. As fucanas são alvo de muitos estudos por apresentarem diversas atividades farmacológicas como, por exemplo: atividade anticoagulante, antitrombótica, antitumoral, dentre outras. A necessidade de se estudar compostos que apresentem atividade antitumoral advém do fato de o câncer ser uma das principais causas de morte no mundo ficando somente atrás dos problemas cardiovasculares. O câncer é caracterizado pela proliferação descontrolada de células de um determinado tecido. Estudos recentes relatam que alguns tipos de polissacarídeos sulfatados como as fucanas apresentam atividade antiproliferativa frente a células de diferentes linhagens tumorais. Com base nisso o objetivo do presente estudo foi extrair e purificar polissacarídeos sulfatados da alga marrom Spatoglossum schröederi e analisar o efeito desses polissacarídeos na proliferação de diferentes linhagens de células tumorais

METODOLOGIA:

Os espécimes da alga Spatoglossum schröederi foram coletados no litoral sul do Rio Grande do Norte e submetidos a uma proteólise por 18h seguida por uma precipitação seqüencial com acetona obtendo-se as seguintes frações: F0,5V; F0,6V; F0,7V; F0,9V; F1,1V; F1,3V e F2,0. As frações foram analisadas através de uma eletroforese em gel de agarose em tampão PDA e coradas com azul de toluidina. A fração F0,9V foi submetida a uma cromatografia de troca iônica e foi possível obter as seguintes frações: F0,3M; F1,0M; F1,5M; F2,0M e F3,0M. Essas frações foram então analisadas através de eletroforese em gel de agarose, cromatografia descendente em papel e dosagem de sulfato para caracterização química. As frações F1,0M; F1,5M e F2,0M foram utilizadas nos testes antiproliferativos utilizando uma linhagem de células derivadas de adenocarcinoma renal (786-0). Para tal as células foram plaqueadas em placa de 96 poços e incubadas por 24 e 48h com os polissacarídeos nas concentrações de 0,1; 0,2 e 0,4mg/mL e a análise foi feita através da redução do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difeniltetrazólio). Os monossarídeos das frações foram identificados e quantificados por HPLC.

RESULTADOS:

A alga marrom S. schröederi possui sete frações polissacarídicas (F0,5V; F0,6V; F0,7V; F0,9V; F1,1V; F1,3V e F2,0). Na análise da eletroforese essas frações apresentaram coloração típica para polissacarídeos sulfatados e foi possível distinguir a presença de três populações de polissacarídeos chamadas de Fuc A, Fuc B e Fuc C. A fração F0,9V foi a única que se mostrou constituída de apenas um dos polissacarídeos, no caso Fuc B, portanto foi escolhida para as análises posteriores. F0,9V foi submetida a uma cromatografia de troca iônica como passo de purificação e foram obtidas as seguintes frações: F0,3M; F1,0M; F1,5M; F2,0M e F3,0M. Dessas, as frações F1,0M; F1,5M; F2,0M apresentaram bandas características da Fuc B. As análises da composição monossacarídica demonstrou proporções semelhantes de xilose:galactose:fucose 1:4:2 nas três fucanas. A dosagem de sulfato dessas três fucanas demonstrou que a F2,0M é a mais sulfatada seguida pela fração F1,5M. Todas as três fucanas inibiram a proliferação da linhagem celular 786-0 nas concentrações testadas. Sendo a que obteve o maior efeito inibitório foi a F1,5M no tempo de 48h (40% com 0,4mg/mL) e que essa inibição foi dose-dependente.

CONCLUSÃO:

A partir da metodologia empregada foi possível a obtenção de sete frações polissacarídicas da alga marrom Spatoglossum schröederi. Essa alga possui as fucanas denominadas de Fuc A, Fuc B e Fuc C. As frações provenientes da cromatografia de troca iônica são constituídas por xilose, galactose e fucose e apresentam diferentes teores de sulfatação. As frações testadas apresentaram efeito antiproliferativo frente a células tumorais. Essas frações apresentam potencial para serem usadas como fármacos antitumorais.

Instituição de Fomento: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior-CAPES; Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnológico-CNPq

Palavras-chave: Polissacarídeos sulfatados , Antitumoral, Algas marrons .