| 62ª Reunião Anual da SBPC |
| C. Ciências Biológicas - 3. Bioquímica - 2. Bioquímica dos Microorganismos |
| SECREÇÃO DE LACASE POR Pycnoporus sanguineus EM MEIO SUPLEMENTADO COM SULFATO DE COBRE E SULFATO DE MAGNÉSIO. |
| Andrey Azedo Damasceno 1 Ademir Castro e Silva 1 Cynara da Cruz Carmo 2 Antônio Maia Júnior 1 Jorge Pontes Koide 1 Vandineth Pires 1 |
| 1. Universidade do Estado do Amazonas/UEA 2. Universidade Federal do Amazonas/UFAM |
| INTRODUÇÃO: |
Lacase, benzenodiol:oxigênio redutase ( EC 1.10.3.2), é uma polifenol oxidase, pertencente à classe de enzimas oxiredutases, também conhecida como oxidase de cobre azul. que catalisa a oxidação de vários substratos com a redução de moléculas de oxigênio a água. Devido ao seu potencial para usos industriais pesquisas vem sendo desenvolvidas a fim de que a sua produção seja maximizada. Diversas fontes de carbono, indutores etc. vêm sendo testados a fim de se buscar a maximização da sua secreção no meio de cultivo por fungos ligninolíticos. Dentre estes encontra-se o fungo Pycnoporus sanguineus, um degradador de madeira seletivo de lignina e que vem sendo estudado em função do seu potencial para uso em diversas aplicações industriais e biotecnológicas. Assim, o presente trabalho objetiva avaliar a influência do sulfato de cobre e magnésio na atividade enzimática de lacase pelo fungo do P. sanguineus. |
| METODOLOGIA: |
Cepa de Pycnoporus sanguineus foi coletada na zona rural do Município de Parintins(AM). Pequenos fragmentos do carpóforo foram inoculados em meio extrato de malte para posterior obtenção da cultura pura utilizada para determinação enzimática. O meio de crescimento para avaliação da atividade enzimática também foi o de extrato de malte suplementado com CuSO4 (M1), a-celulose + CuSO4 (M2), MnSO4 (M3), a-celulose + MnSO4 (M4) e a-celulose (M5). A atividade enzimática ocorreu no período de 20 dias de fermentação sendo a atividade de lacase determinada conforme metodologia proposta por Szklarz (1989) que consiste na oxidação do substrato enzimático de seringaldazina até a sua forma quinona com leitura da absorbância em espectrofotômetro a 525 nm (ε= 65.000 M-1. cm-1). Todo o teste foi feito em triplicatas. |
| RESULTADOS: |
| Como a lacase é uma enzima que contém cobre, estudos têm mostrado que a sua adição ao meio de cultura, aumenta a produção da enzima. Nosso resultado mostra que a atividade de lacase no meio M1, suplementado apenas com o indutor CuSO4, foi 266 % maior (0,22 U.L-1) em relação ao controle (0.06 U.L-1). Entretanto, o meio suplementado com a-celulose e CuSO4 (M2) inibiu quase que completamente a atividade enzimática (0,06 U.L-1) indicando que o indutor foi desativado na sua capacidade de aumentar a produção. A atividade de lacase em meio (M4) suplementado com a-celulose e MnSO4 foi de 0,40 U.L-1. No meio M3 suplementado com apenas MnSO4 a atividade enzimática foi 2,2 vezes menor do que no meio M4. Crescimento do fungo Pycnoporus sanguineus no meio malte suplementado apenas com a-celulose (M5) apresentou uma atividade enzimática de lacase (1,8 U.L-1) 4,5 maior do que no meio onde este componente foi testado juntamente com MnSO4 (0,40 U.L-1). De modo geral, no meio suplementado apenas com a-celulose a atividade enzimática do fungo foi maior do que naquele onde este componente aparece juntamente com MnSO4, e a atividade enzimática é quase que totalmente inibida quando presente com CuSO4 . |
| CONCLUSÃO: |
| A adição do cobre ao meio de cultura aumentou a produção da lacase por Pycnoporus sanguineus, mas inibiu quando presente com a-celulose. |
| Instituição de Fomento: CNPq; FAPEAM |
| Palavras-chave: Enzimas lignolíticas, Fungo Amazônico, Indutores de Lacase. |