63ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 6. Farmacologia - 3. Toxicologia

MELANOMACRÓFAGOS BRANQUIAIS E SEU PAPEL NA TOXICIDADE AGUDA PROMOVIDA PELO AGROTÓXICO ROUNDUP TRANBSORB® NO GUARU Poecilia reticulata

Thiago Lopes Rocha 1 Ana Paula Rezende dos Santos 1 Viviane Gomes Barroso 1 Mariane Brom Sobreiro 1 Simone Maria Teixeira Sabóia-Morais 1,2

1. Depto. de Morfologia, Instituto de Ciências Biológicas (ICB) / UFG 2. Profa. Dra. Orientadora - Depto. de Morfologia, Instituto de Ciências Biológicas (ICB) / UFG

INTRODUÇÃO:

Melanomacrófagos (MMs) são macrófagos pigmentados que ocorrem em variados órgãos de vertebrados heterotérmicos Esse tipo celular geralmente é identificado por sua associação entre si, formando centros de MMs. Eles são encontrados na matriz de tecidos hematopoiéticos, principalmente no estroma dos rins e baço. Nos teleósteos, os MMs foram identificados principalmente nos rins, baço e fígado, com escassos trabalhos sobre os MMs branquiais, cerebrais e gonadais. Nos três primeiros órgãos, os MMs podem conter melanina,fragmentos celulares, grânulos de hemosiderina e resíduos de lipofusina, devido principalmente às suas funções de sequestramento de debris celulares e de materiais potencialmente tóxicos, além de participarem da resposta dos peixes a agentes infecciosos, tais como fungos e bactérias. Além disso, alguns autores têm sugerido que centros de MMs são bons indicadores da saúde e bem-estar das populações de peixes. Nesse sentido, no presente trabalho visou-se analisar os MMs nas brânquias do guaru Poecilia reticulata em condição normal e sob o estresse ambiental causado pelo herbicida comercial Roundup Transorb®. Dessa maneira, espera-se obter dados que contribuam para a melhor compreensão da morfofuncionalidade desse tipo celular nas brânquias de peixes e seu papel na resposta inicial dos teleósteos frente aos efeitos tóxicos dos herbicidas.

METODOLOGIA:

Machos e fêmeas de Poecilia reticulata obtidos do Biotério de animais aquáticos do Laboratório de Comportamento Celular (LCC/ICB/UFG) foram expostos a 3,5µl.L-1 do herbicida Roundup Transorb® em água declorinada, por um período total de zero (T0) (grupo controle), 4 (T4), 8 (T8), 12 (T12) e 24 (T24) horas de exposição. Os machos e as fêmeas possuíam peso e comprimento total de 0,09 ± 0,03g, 0,17 ± 0,08g, 2,09 ± 0,19 cm, 2,56 ± 0,38cm, respectivamente. Oito animais por grupo foram expostos ao herbicida em sistema estático, sem renovação de água, provido de aeração e controlado quanto aos fatores físico-químicos da água. Após a exposição, os animais foram eutanizados por decapitação e as brânquias foram dissecadas para as análises citohistológica dos MMs. Para tanto, as brânquias fixadas por imersão em Karnovsky (glutaraldeído 2,5%, paraformaldeído 4% em tampão fosfato de sódio 0,1M pH 7,2) por 2 horas, incluídas em historesina (Leica, Germany), seccionadas com 2,5 µm de espessura e coloradas com Azul de Toluidina (AT) 1% pH 8,4. O estudo dos MMs foi realizado no fotomicroscópio LEICA DMLB - USA, com auxílio dos programas VidCap e Image ProPlus. As análises estatísticas foram realizadas no programa Statistic 7.0, por meio da ANOVA, teste de Tukey e nível de significância igual a 0,05.

RESULTADOS:

Os MMs branquiais são células com formato irregular e se encontram agrupadas, formando centro de MMs principalmente nos rastelos e nos filamentos branquiais, geralmente próximos aos vasos sanguíneos. Por meio da coloração com AT 1% pH 8,4, os MMs apresentaram-se com grânulos negros e/ou castanhos escuros, indicando sua função de sequestramento de debris celulares e provável formação de grânulos de hemosiderina. Esse tipo celular foi identificado nas brânquias de machos e fêmeas do guaru, tanto nos grupos controle (T0), quanto nos grupos expostos ao herbicida RT (T4, T8, T12 e T24). As análises estatísticas indicam que não há diferenças significativas quanto a quantidade (medida pela taxa de número de filamentos branquiais com MMs sobre o número total de filamentos analisados) e a área de MMs branquiais (medida pela taxa da área total de MMs sobre o número de filamentos analisados) quanto ao sexo, nem entre os grupos de exposição aguda ao RT. As análises histológicas confirmaram a ausência de parasitas nas brânquias do guaru, os quais poderiam alterar a resposta dos MMs.

CONCLUSÃO:

Esse é o primeiro trabalho que descreve os MMs branquiais na espécie biomonitora Poecilia reticulata. Nessa espécie os MMs localizam-se preferencialmente nos rastelos e filamentos branquiais. Sugere-se que os MMs dos rastelos branquiais possam migrar ao longo dos filamentos branquiais para realizar funções fagocitárias de materiais nocivos ao tecido branquial. O presente trabalho indica que não existe diferença quanto à localização, morfologia, quantidade e área dos MMs entre machos e fêmeas de Poecilia reticulata. Além disso, sugere-se que os MMs sejam células que participam da resposta imunitária dos peixes ao agrotóxico somente em exposições crônicas, ou em períodos maiores do que 24 horas, visto que os mesmos não apresentaram modificações significativas nas respostas iniciais do guaru sob os efeitos tóxicos do herbicida RT.

Palavras-chave: Brânquias, Guaru, Melanomacrófagos.