63ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 8. Genética - 1. Genética Animal

CARACTERIZAÇÃO CITOGENÉTICA DA ESPÉCIE Rhinella granulosa DE ÁREAS DO CERRADO DO ESTADO DE GOIÁS.

Wanessa Fernandes Carvalho 1 Caio César Neves Sousa 1 Macks wendell Gonçalves 1 Daniela de Melo e Silva 1 Rogério Pereira Bastos 2 Aparecido Divino da Cruz 1

1. Aluna de iniciação científica - Depto de Ciências Biológicas - PUC- Goiás 2. Aluno de iniciação científica - Depto de Ciências Biológicas - PUC- Goiás 3. Aluno de iniciação científica - Depto de Ciências Biológicas - PUC- Goiás 4. Profa. Dra./ Orientadora - Departamento de Ciências Biológicas - PUC - Goiás 5. Prof. Dr. - Departamento de Ciências Biológicas - UFG 6. Prof. Dr./ Coordenador do Núcleo de Pesquisa Replicon - Departamento de Ciências Biológicas - PUC - Goiás

INTRODUÇÃO:

Os anfíbios apresentam características sedentárias como pele permeável, ovos sem casca, ciclo de vida com duas fases (uma terrestre e a outra aquática), além de serem importantes componentes de muitas comunidades ecológicas, sejam consumindo uma infinidade de insetos ou servindo de presas para outros animais. O gênero Rhinella possui 77 espécies, agrupadas a maioria na América do Sul, onde um complexo de espécies que foi considerado como uma única espécie, até então B. granulosus, agora R. granulosa, é na verdade constituído de várias espécies. Este estudo teve como objetivo caracterizar citogeneticamente a espécie Rhinella granulosa, Spix, 1824, contribuindo assim para um melhor entendimento das relações entre as espécies deste gênero.

METODOLOGIA:

Para tanto foi coletado dois espécimes de Rhinella granulosa, no município de Barro Alto, estado de Goiás. Foi aplicado por três dias consecutivos Fitohemaglutinina M (10%) intraperitonialmente, na proporção 0,1 ml para cada 10 g do peso do animal visando à proliferação dos linfócitos T. Ao quarto dia foi aplicado colchicina na mesma proporção para a interrupção do ciclo celular. Foi obtida as suspensões celulares de baço, fígado e medula óssea que foi hipotonizada em KCl a 0,075 M por uma hora e centrifugadas com fixador de Carnoy ( metanol + ac. acético na proporção de 3:1) por pelo menos três vezes para retirada de restos celulares. Os materiais obtidos foram gotejados em lâminas limpas e em seguida hidrolisadas com HCl a 10% . Posteriormente foram coradas com Giemsa a 8% para a determinação do número diplóide e morfologia cromossômica. Para a obtenção das RONs (regiões organizadoras de nucléolo), por meio do nitrato de prata (AgNO3), foi colocada 1 gota de solução coloidal reveladora (gelatina + ácido fórmico) e duas gotas de solução de nitrato de prata (AgNO3) a 50%, em seguida as lâminas foram cobertas com uma lamínula e foram incubadas por 5 minutos em câmara úmida. A lamínula foi retirada com água destilada e a lâmina corada por 10 minutos em solução de Giemsa a 8 %. Para a captura e pareamento das metáfases foi utilizado microscópio óptico e o programa Ikaros ®, versão 3.1 (Metasystems).

RESULTADOS:

A análise das lâminas revelou que a espécie estudada apresentou um número diplóide de 2n=22 e número fundamental NF=44 com os pares cromossômicos 1, 2, 5, 6, 7, 8, 10 e 11 metacêntricos e os pares cromossômicos 3, 4 e 9 submetacêntricos, com a NOR presente no braço longo do par cromossômico 5. Em um dos espécimes estudados verificou-se a presença de uma região de menor compactação na porção telomérica do braço longo do cromossomo 5, fato não observado no segundo indivíduo, indicando uma provável região de constrição secundária neste espécime.

CONCLUSÃO:

A análise das lâminas revelou que a espécie estudada apresentou um número diplóide de 2n=22 e número fundamental NF=44 com os pares cromossômicos 1, 2, 5, 6, 7, 8, 10 e 11 metacêntricos e os pares cromossômicos 3, 4 e 9 submetacêntricos, com a NOR presente no braço longo do par cromossômico 5. Em um dos espécimes estudados verificou-se a presença de uma região de menor compactação na porção telomérica do braço longo do cromossomo 5, fato não observado no segundo indivíduo, indicando uma provável região de constrição secundária neste espécime.

Palavras-chave: citogenética, anuros, RONs.