63ª Reunião Anual da SBPC
C. Ciências Biológicas - 11. Morfologia - 3. Citologia e Biologia Celular
HISTOMETRIA NO FÍGADO DE Poecilia vivipara EXPOSTO AO HERBICIDA ROUNDUP®
Sandra de Sousa Santos 1
Ana Paula Rezende dos Santos 2
Fernando Santiago Pires 3
Joana Cristina Neves de Menezes Faria 4
José Carlos Seraphin 5
Simone Maria Teixeira de Sabóia-Morais 6
1. Depto. de Morfologia, Instituto de Ciências Biológicas (ICB) – UFG
2. Depto. de Morfologia, Instituto de Ciências Biológicas (ICB) – UFG
3. Depto. de Morfologia, Instituto de Ciências Biológicas (ICB) – UFG
4. Depto. de Morfologia, Instituto de Ciências Biológicas (ICB) – UFG
5. Prof. Dr./Co-orientar - Inst. de Matemática e Estatística - IME / UFG
6. Profa. Dra./Orientadora – Depto. de Morfologia – ICB / UFG
INTRODUÇÃO:
O desenvolvimento acelerado da agricultura tem elevado o consumo de herbicidas, tornando-os cada vez mais frequentes e comuns em larga escala, principalmente nos países de terceiro mundo e em países emergentes. Dentre os agrotóxicos, destacam-se os herbicidas não-seletivos como Roundup® original glifosato N-(fosfonometil) glicina, que é o mais utilizado em todo mundo em áreas agrícolas e urbanas (Souza et al. 2006, Albinati et al. 2007). Em função da ampla utilização destes produtos tóxicos, observa-se a necessidade de avaliar a toxicidade dos mesmos no ambiente. Com objetivo de conhecer e quantificar em células e tecidos os efeitos do herbicida Roundup® em representante da biota aquática utilizou-se o guaru (Poecilia vivipara) como uma espécie bioindicadora, uma vez que os peixes do gênero Poecilia são sensíveis a substâncias tóxicas. Foram mensurados os efeitos do herbicida no tecido hepático do guaru por meio de análises histométricas nos hepatócitos dos peixes expostos em diferentes concentrações do produto. O estudo da morfologia aliado aos dados histométricos permitiu diagnóstico das alterações histopatológicas no fígado tais como: intenso processo de vacuolização e modificações na histoarquitetura do parênquima hepático em todos os grupos tratados.
METODOLOGIA:
Os peixes foram adquiridos na Escola de Medicina Veterinária da UFG, aclimatados e monitorados com controle da oxigenação, temperatura de 26ºC, amônia (NH3) de zero (0) ppm, pH 6,9 e fotoperíodo de 12 horas no biotério do Laboratório de Comportamento Celular ICB/UFG. Após aclimatação de 72 horas em aquários de 40L, vinte fêmeas adultas foram submetidas à exposição aguda de 24 horas nas concentrações 0, 15, 25 e 35 µl/L do herbicida Roundup®. Os espécimes que se mantiveram vivos após a exposição foram sacrificados por decapitação e destes foram retirados o fígado para análise histológica. O material biológico foi fixado em Karnovsky, incluído em Historesina, seccionados a 1 μm de espessura e os cortes corados com Azul de Toluidina pH 8,5. As investigações feitas no microscópico fotônico (LEICA DMLB - USA) acoplado ao sistema de captura de imagens utilizaram as objetivas de 40x pelo programa Image Pro-Plus 6.0. Nas medidas morfométricas do fígado foi mensurado a densidade volumétrica dos hepatócitos (DVH), a partir da contagem do número de células hepáticas com nucléolo evidente na porção central do parênquima hepático. As análises dos dados obtidos foram realizadas com base na Análise de Variância (ANOVA) e no teste de comparação de médias Tukey usando o nível de significância de 5%.
RESULTADOS:
Nas análises histopatológicas foram verificadas alterações significativas no tecido hepático em Poecilia vivipara de forma crescente de acordo com as diferentes concentrações do herbicida nos grupos tratados. No grupo de 35µl/L não foi possível a análise morfométrica, uma vez que para esta concentração houve apenas um peixe sobrevivente para análise, por ter sido exposto a uma concentração além da CL50 determinada para o P. vivipara exposto ao herbicida Roundup® (CL50 = 26,61 µl/L). Para as demais concentrações tivemos um total de 15 peixes, ou seja, cinco peixes por tratamento. Observou-se a diminuição da densidade volumétrica dos hepatócitos (DVH), entre as concentrações 0 e 15µl/L e 0 e 25µl/L conforme o aumento da concentração do herbicida. Esta alteração é facilmente identificada ao observar e comparar a morfologia geral do tecido hepático em peixes que não foram expostos e peixes tratados. Infere-se que este fato seja decorrente do processo crescente de vacuolização nos hepatócitos dos grupos tratados quando comparados ao grupo controle.
CONCLUSÃO:
Por meio desses dados demonstra-se a alta toxicidade do herbicida Roundup® para o modelo teste, indicando a relevância da histopatologia no diagnóstico de efeitos de agentes intervenientes. Ressalta-se ainda a importância de se mensurar a ação de agentes tóxicos em patologias celulares e teciduais. Nas análises feitas averiguou-se que a exposição aguda para o Poecilia vivipara comprometeu a morfologia do fígado. Este pode ser considerado um excelente órgão alvo para estudos que qualificam o bem estar de peixes em diferentes situações de contaminação. Tais alterações morfológicas possivelmente desencadeiam alterações fisiológicas que devem ser avaliadas através de pesquisas, pois são essenciais para melhor compreensão do comportamento deste herbicida em peixes. O monitoramento constante de impactos ambientais pela utilização de herbicidas em organismos vivos é um objetivo que deve ser alcançado.
Palavras-chave: Guaru, Histometria, Fígado.