63ª Reunião Anual da SBPC

D. Ciências da Saúde - 4. Odontologia - 10. Odontologia

Avaliação da Expressão da Perforina por Linfócitos T Citotóxicos em Carcinoma Espinocelular da Cavidade Oral e Lábio

Luis Gustavo Jaime Paiva 1 Aline Carvalho Batista 1,2 Andréia de Souza Gonçalves 1 Nádia do Lago Costa 1

1. Laboratório de Patologia bucomaxilofacial - UFG 2. Profa. Dra. / Orientadora

INTRODUÇÃO:

Linfócitos T citotóxicos CD8+ (LTCs) são as células mais efetivas no combate as células tumorais. Após a formação de uma sinapse imunológica entre LTCs e a célula-alvo, os LTCs liberam grânulos citotóxicos ricos em perforina e granzima B (GB). A perforina forma poros na membrana da célula-alvo os quais facilitam a penetração da GB para o citosol. Uma vez no interior da célula, a GB é capaz de promover a morte apoptótica via caspases ou através da via mitocondrial da apoptose, com as proteínas pró-apoptótica Bax e anti-apoptótica Bcl-2. O sistema perforina/GB apresenta um importante papel na imunidade tumoral e tem sido associado com um prognóstico favorável em diferentes tipos de cânceres. Em câncer de boca, recentemente nós demonstramos que pacientes com alta densidade de LTCs apresentaram, também, menor índice de metástase linfonodal e maior sobrevida quando comparado aos pacientes com baixa densidade dessas células.

METODOLOGIA:

SELEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DA AMOSTRA 10 amostras de CEC de cavidade oral com metástase, 10 amostras de CEC de cavidade oral sem metástase e 10 amostras de CEC de lábio foram selecionados nos arquivos do Serviço de Anatomia Patológica do HAJ/ACCG. TÉCNICA IMUNOISTOQUÍMICA Método: Polímero (EnVision®+ Dual Link System-HRP, Dako, Carpinteria, CA, USA) Anticorpos primários: monoclonal de camundongo anti-CD8 humano (clone C8/144B; Dako, Carpinteria, CA, USA 1:50), policlonal de coelho anti-perforina humano (clone H-315, Santa Cruz Biotechnology, CA, USA 1:150). ANÁLISE QUALITATIVA , QUANTITATIVA E ESTATÍSTICA DOS DADOS Na avaliação qualitativa investigamos a distribuição e intensidade de imunomarcação das células CD8+/perforina+. As células CD8+/Perforina+ foram quantificadas na região de fronte de invasão tumoral das amostras selecionadas em 10 campos microscópicos alternados, utilizando um retículo de integração em rede quadrada (CARL ZEISS). Registramos a densidade de células CD8+/Perforina+ por mm2. A análise estatística foi expressa pela média ± desvio padrão de n observações por mm2. As análises comparativas foram realizadas utilizando o teste não-paramétrico de Mann-Whitney. O nível de significância considerado foi de 5%.

RESULTADOS:

A análise da amostras imunomarcadas revelou que as células CD8+/Perforina+ apresentaram morfologia de linfócitos, com um halo de coloração marrom, e exibiram um padrão de coloração granular avermelhado ou marrom enegrecido no citoplasma. As células CD8+/Perforina+ concentraram-se predominantemente no fronte de invasão tumoral e invadindo o parênquima tumoral .A análise comparativa da densidade de células CD8+/Perforina+ evidenciou que essa população celular foi significativamente maior nas amostras de CEC de lábio quando comparado aos grupos CEC de cavidade oral com e sem mestástase (P<0,05). Adicionalmente, nossos resultados demonstraram uma maior densidade dessas células nas amostras de CEC de cavidade oral sem mestástase quando comparado ao CEC de cavidade oral com metástase (P<0,05). O presente estudo avaliou a densidade de células CD8+/Peforina+ em CEC de lábio e de cavidade oral com e sem metástase. Nossos resultados evidenciaram uma densidade de células CD8+/perforina+, significativamente maior no CEC de lábio quando comparado com o CEC de cavidade oral. Dessa forma, pode-se sugerir que o fato do CEC de lábio ter um melhor prognóstico em relação ao CEC de cavidade oral, esteja relacionado à maior densidade dessas células CD8+/perforina+. Nossos resultados demonstraram ainda uma expressão significativamente maior de células CD8+/perforina+ no CEC de cavidade oral sem metástase quando comparado com o metastático.

CONCLUSÃO:

Em conclusão nossos resultados sugerem que a presença de células CD8+ com expressão da perforina no microambiente do CEC de boca, pode ter efeito benéfico no combate às células tumorais, contribuindo, assim, para uma menor metástase e agressividade tumoral. Acreditamos ainda, que estudos nessa linha de investigação devam continuar a serem realizados, visando um melhor entendimento da imunidade tumoral e propiciando uma maior compreensão da fisiopatologia dos processos neoplásicos.

Palavras-chave: Carcinoma espino celular, Imunidade Tumoral, Linfócito T CD8+.