63ª Reunião Anual da SBPC

C. Ciências Biológicas - 8. Genética - 5. Genética Vegetal

UTILIZAÇÃO DO SISTEMA TESTE DE ALLIUM CEPA PARA AVALIAÇÃO GENOTÓXICA E MUTAGÊNICA DE AMOSTRAS DE ÁGUAS DO RIO VERRUGA.

Luana Duque Ribeiro Almeida 1 Gabriela Andrade Limoeiro Silva 2 Géssica Oliveira Bezerra 3 John Rick Lima de Oliveira 4 Eliane Mariza Dortas Maffei 5

1. Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia 2. Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia 3. Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia 4. Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia 5. Profª Doutora/Orientadora, DCN, UESB, Campus Vitória da Conquista - BA.

INTRODUÇÃO:

A cebola (Allium cepa); tem sido utilizada como bioindicador de ambientes aquáticos e tem sido fundamental tanto no monitoramento da poluição ambiental, quanto na avaliação do potencial mutagênico de muitos compostos químicos. O teste do micronúcleo é o ensaio, in vivo;, mais amplamente utilizado para a detecção de agentes clastogênicos (que quebram cromossomos) e aneugênicos (que induzem aneuploidia ou segregação cromossômica anormal), sendo internacionalmente aceito como parte da bateria de testes recomendada para a avaliação do potencial mutagênico e para o registro de novos produtos químicos que entram anualmente no mercado mundial. O Rio Verruga é um afluente do Rio Pardo e o curso de suas águas tem como limites a região correspondente aos municípios de Vitória da Conquista e parte do município de Itambé, representando uma área total de 970.32 km² da Bacia do Rio Verruga, se encontrando desta forma em área de impacto ambiental. O objetivo deste trabalho foi utilizar as raízes de Allium cepa; como bioindicador por meio do teste de micronúcleos para analisar a qualidade dos recursos hídricos das águas do Rio Verruga.

METODOLOGIA:

Coletaram-se amostras de água do Rio Verruga - BA no ano de 2009, em dois pontos com diferentes graus de impactos. O ensaio com Allium cepa foi feito pelo teste de micronúcleos. As raízes cresceram à temperatura ambiente, foram coletadas e fixadas em Carnoy. Realizou-se o preparo citológico com coloração pelo método de Feulgen. Após a coloração, foi realizada a montagem das lâminas permanentes com lamínulas, xilol e bálsamo do Canadá e analisadas no fotomicroscópio Leica. Foram realizados três tratamentos, controle negativo com água destilada, águas coletadas na região de preservação do Poço Escuro e águas coletadas no bairro de Santa Marta. As análises dos micronúcleos foram realizadas com contagem de células na intérfase em três indivíduos de cada tratamento e os valores foram transformados em médias. As alterações nas fases do ciclo celular foram avaliadas qualitativamente.

RESULTADOS:

Foram analisadas em média 1.063 células no controle negativo e não foram encontrados micronúcleos, a mitose ocorreu de forma normal. Na água testada do Rio Verruga coletada na área de preservação do Poço Escuro a média de células quantificadas foi 1.114, sendo a contagem de micronúcleos foi em média 3, sendo considerado normal. Este resultado é importante indicando a não existência potencial carcinogênico neste ponto de coleta. No entanto, a análise qualitativa revelou alterações nas fases do ciclo celular como pontes anafásicas, C-metáfases e sincronização de células na telófase em grande quantidade, sugerindo a possível existência de potencial mutagênico induzido por algum agente presente na água. No ponto de coleta em Santa Marta avaliou-se em média 935 células e a ocorrência de micronúcleos foi em média 17, sendo considerada muito alta. Neste tratamento observou-se que somente 1,9% das células estavam em divisão celular. Dentre as anormalidades mais observadas durante a divisão celular se destacaram as células binucleadas, pontes na anáfase e C-metáfases. Os resultados indicam a existência na água analisada de agentes genotóxicos e mutagênicos causadores de alterações no ciclo celular.

CONCLUSÃO:

O teste foi bastante eficiente, indicando a necessidade de se ampliar os pontos de coletas e que se aumente a frequência das coletas e análises visando o biomonitoramento. Foi possível observar uma diferença significativa de micronúcleos encontrados entre as áreas analisadas, pois na área de preservação a presença de micronúcleo foi considerada não significativa e na área urbana bem elevada.

Palavras-chave: Teste de Micronúcleo, Mutagênese, Clastogênese.